Pūtau Tapeke RNA Wehewehenga Kete Tapeke RNA Wehewehenga Kete Pure mai i te pūtau
Whakaahuatanga kete:
Ka taea te whiwhi RNA tapeke tino purea me te kounga teitei mai i nga momo momo tipu i roto i te 11 meneti.
RNase-Free
Ka whakahaerehia i te pāmahana rūma (15-25 ℃)
Me te Tiwae Whakapai DNA
Hua RNA teitei
Tere:Whakaotia te tangohanga i roto i te 11 meneti
Haumaru: Kore he matū pararopi
Whakaahuatanga
Ka whakamahia e tenei kete te pou miro me te tauira i hangaia e Foregene, ka taea te tango i te RNA tapeke parakore me te kounga teitei mai i nga pūtau i whakatipuria ki nga pereti 96, 24, 12, me te 6-puna.
Ka whakaratohia e te kete he Tiwae Whakapai DNA pai, ka taea te wehe ngawari i te supernatant me te lysate pūtau, te here me te tango i te DNA genomic.He ngawari te mahi me te whakaora wa.
Tka taea e ia te Tiwae RNA-anake te here i te RNA me tetahi tauira ahurei.He maha nga tauira ka taea te tukatuka i te wa kotahi.
Nga waahanga kete
| Te titonga kete | RE-03111 | RE-03114 |
| 50 T | 200 T | |
| Pupuri cRL1* | 25 mL | 100 mL |
| Pupuri cRL2 | 15 mL | 60 mL |
| Pupuri RW1* | 25 mL | 100 mL |
| Kaipupuri RW2 | 24 mL | 96 mL |
| RNase-Free ddH2O | 10 mL | 40 mL |
| RNA-anake Tīwae | 50 | 200 |
| Tiwae Whakapai DNA | 50 | 200 |
| Tohutohu | 1 | 1 |
* Tena koa mau karapu me te whai i nga tikanga whakamarumaru i te wa e mahi ana i te mea kei roto i te Buffer cRL1 me te Buffer RW1 nga tote riri kino.
Nga waahanga me nga painga
■ Ko te tukanga katoa e whakahaerehia ana i te pāmahana rūma (15-25 ℃), kaore he pati hukapapa me te iti o te wera o te centrifugation.
■ Ko te katoa o te kete he RNase-Free, kaua e manukanuka ki te whakahekenga o te RNA.
■ Ko te Tiwae Horoi A-DNA e herea ana i te DNA, kia taea ai e te kete te tango i te parahanga DNA ira me te kore e taapiri atu i te DNase.
■ Hua RNA teitei: Ko te Tiwae RNA-anake me te tauira ahurei ka taea te pure i te RNA.
■ Tere tere: ngawari ki te whakahaere, ka taea te whakaoti i roto i te 11 meneti.
■ Haumaru: Kaore e hiahiatia he reagent pararopi.
■ Te kounga teitei: Ko te RNA kua purea he tino parakore, kaore he pūmua me etahi atu poke, a ka taea e ia te whakatutuki i nga momo whakamatautau ka whai ake.
Te tono kete
He pai mo te tangohanga me te purenga o te RNA katoa mai i nga pūtau ahurea i roto i nga papa 96, 24, 12, me te 6-puna.
Te rere mahi
Hoahoa
Ko te hoahoa pūhiko rā agarose o Cell Tapeke RNA Wehewehenga Kit i tukinotia nga tau rerekē o runga ake o ngā pūtau, 20μl rōrahi elution, tangohia 2μl pure katoa RNA 1%.
Te rokiroki me te oranga o te papa
Ka taea te penapena i te kete mo te 12 marama ki te pāmahana rūma (15-25 ℃) 2-8 ℃ ranei mo te wa roa (24 marama).
Ka taea te penapena Buffer cRL1 ki te 4 ℃ mo te 1 marama i muri i te taapiri i te 2-hydroxy-1-ethanethiol(he kowhiri).
Kaore te RNA e tangohia, he iti ranei nga hua RNA
He maha nga momo ahuatanga e pa ana ki te pai o te whakaora, penei i: tauira kiko RNA ihirangi, tikanga mahi, rōrahi elution, etc.
1. I mahia te kaukau tio, cryogenic (4 °C) centrifugation i te wa e mahi ana.
Taunakitanga: Mahi i te pāmahana rūma (15-25 ° C) puta noa i te tukanga katoa, kaua e kaukau i te hukapapa me te centrifuge i te pāmahana iti.
2. He pai te tiaki tauira, he nui rawa te waa rokiroki tauira.
Taunakitanga: Whakaorangia nga tauira ki te -80 °C, whakatio ranei i roto i te hauota wai me te karo i te whakamahi whakatio-rewa;ngana ki te whakamahi i te kiko hou, i nga pūtau ahurea ranei mo te tangohanga RNA.
3. He iti rawa te tauira lysis.
Taunakitanga: I te wa e whakakotahi ana i te kiko, me whakarite kia rite te kiko o te kiko me te wehea nga pūtau kiko hei whakamarama i te tukunga o te RNA.
4. Karekau i tika te taapiri i te eluent.
Taunakitanga: Whakaū ko RNase-Free ddH2Ka taapirihia te O ki te taha ki waenganui o te kiriuhi pou purenga.
5. Ko te rōrahi tika o te waihā tino kore i tāpirihia ki te Buffer RL2, te Buffer RW2 ranei.
Taunakitanga: Whaia nga tohutohu, taapirihia te rōrahi tika o te waihā pūmau ki te Buffer RL2 me te Buffer RW2 ka uru pai i mua i te whakamahi i te kete.
6. Ko te inenga tauira o te kopa kaore e tika.
Taunakitanga: Whakamahia te 10-20 mg o te kiko (1-5) × 10 ranei6nga pūtau mo te 500 μl buffer RL1, na te nui o te whakamahi kiko ka taea te whakaheke i te tangohanga RNA.
7. Ko te rōrahi elution hē, te hauhā kore rānei.
Taunakitanga: Ko 50-200 μl te rōrahi elution o te tīwae pure;Mena kaore i te pai te paanga o te whakamaarama, ka tūtohu kia whakaroahia te wa tuunga pāmahana rūma i muri i te taapiri i te RNase-Free ddH kua whakamahana.2O, hei tauira mo te 5-10 min.
8.Ko te tīwae purenga he toenga waihā i muri i te horoinga Buffer RW2.
Taunakitanga: Mena he toenga waihano i muri i te horoinga o te Buffer RW2, te centrifugation ngongo kau mo te 1min, ka taea te whakanui ake i te wa mo te mahi centrifugation ngongo kau ki te 2min, ka taea ranei te whakanoho i te pou purea ki te pāmahana rūma mo te 5 min ki te tango tika i te toenga waiwaro.
Kua whakahekehia te RNA kua purea
Ko te kounga o te RNA kua purea e pa ana ki nga ahuatanga penei i te tiaki i te tauira, te poke RNase, me te raweke, me era atu.
1. Ko nga tauira o te kopa kaore i te pupuri i te waa.
Taunakitanga: Ki te kore e whakamahia nga tauira kiko, nga pūtau ranei i te wa tika i muri i te kohi, ka tiakina tonutia i te -80 °C, hauota wai ranei.Hei tango i te RNA, whakamahia he kiko hou, he tauira pūtau ranei ka taea.
2. Te whakatio-whakarewa o nga tauira kiko.
Taunakitanga: I te wa e penapena ana i nga tauira kiko, he pai ake kia tapahia ki nga wahi iti mo te tiaki, ka tango i tetahi o nga waahanga ina whakamahia kia kore ai e rewa-rewa te tauira me te paheketanga o te RNA.
3. Ka whakauruhia te RNase, kaore ranei e mau i nga karapu tuku, he kanohi kanohi, me etahi atu i te wa e mahi ana.
Taunakitanga: He pai rawa atu nga whakamatautau tangohanga RNA i roto i nga ruma raweke RNA motuhake, ka whakawāteahia te teepu i mua i te whakamatautau.
Whakamaua nga karapu tuku me nga kanohi kanohi i te wa o te whakamatautau hei whakaiti i te paheketanga o te RNA na te whakaurunga o te RNase.
4. Kua poke nga reagents ki te RNase i te wa e whakamahia ana.
Taunakitanga: Whakakapihia ki te Kete Motuhake RNA Tapeke Kararehe hou mo nga whakamatautau e pa ana.
5. Ko nga ngongo centrifuge, nga tohutohu, me era atu e whakamahia ana i roto i te whawhe RNA kua poke ki te RNase.
Taunakitanga: Whakauhia ko nga ngongo centrifuge, nga tohutohu, nga pipettes, me etahi atu e whakamahia ana i te tangohanga RNA he RNase-Kore katoa.
Ko te RNA kua purea ka pa ki nga whakamatautau o raro
Ko te RNA kua purea e te pou purenga, mena he nui rawa nga katote tote, he nui rawa te ihirangi pūmua ka pa ki te whakamatautau whakararo, penei: te whakamuri whakamuri,Northern Blot et al.
1. He toenga katote tote kei te RNA kua whakahiahia.
Taunakitanga: Whakapumautia kua taapirihia te rōrahi tika o te waihā ki te Buffer RW2 ka mahia kia 2 nga horoinga o te pou purenga i te tere o te hau i tohuhia mo te mahi;ki te mea he toenga katote tote, waiho te pou purenga ki te Buffer RW2 mo te 5 meneti i te pāmahana rūma me te mahi centrifugation ki te whakanui i te tangohanga o te poke tote.
2. Te toenga o te waihano i roto i te RNA elutioned.
Taunakitanga: Whakapumauhia i muri i te horoinga o te RW2, mahia te mahi centrifugation ngongo kau i te tere centrifugation e tohuhia ana mo te mahi, whakanuia te wa o te mahi centrifugation ngongo kau ki te 2 min mena kei te noho tonu te toenga waihano, waiho ranei i te pāmahana rūma mo te 5 m
