Te whakamaarama mo nga kupu koiora rapoi taketake
1. cDNA me cccDNA: Ko te cDNA he DNA whenu-rua i whakahiatohia e te whakawhitinga whakamuri mai i te mRNA;Ko te cccDNA he DNA porowhita kati-a-waa-rua plasmid kaore i te chromosome.
2. Waeine whakakopa paerewa: ka taea e te waeine hanganga tuarua pūmua α-helix me β-pepa te hanga poraka hanganga me nga whakaritenga ahuahanga motuhake ma nga momo polypeptides honohono.Ko tenei momo whakakopa kua whakatauhia e kiia ana ko te hanganga tino tuarua.Tata ki te katoa o nga hanganga tuatoru ka taea te whakaahua e enei momo kopaki, tae noa ki o raatau momo whakakotahi, no reira ka kiia hoki ko nga waahanga kopa paerewa.
3. CAP: cyclic adenosine monophosphate (cAMP) receptor protein CRP (cAMP receptor protein), te matatini i hangaia i muri i te huinga o te cAMP me te CRP ka kiia ko te activating protein CAP (cAMP activated protein).
4. Te raupapa Palindromic: Ko te raupapa taapiri whakamuri o tetahi wahanga o te kongakonga DNA, he waahi whakarara i te nuinga o te waa.
5. micRNA: Ko te RNA pokanoa, ko te RNA antisense ranei, he taapiri ki te raupapa mRNA ka taea te aukati i te whakamaoritanga o te mRNA.
6. Ribozyme: RNA ki te mahi catalytic, e whai wāhi autocatalytic i roto i te tukanga splicing o RNA.
7. Motif: Kei etahi rohe o te rohe he rite te ahua toru-ahu me te topology i roto i te hanganga mokowhiti o nga ngota ngota pūmua.
8. Te peptide tohu: he peptide me nga toenga waikawa amino 15-36 i te N-terminus i te wa o te whakahiato pūmua, e arahi ana i te whakawhiti o te pūmua.
9. Attenuator: He raupapa nucleotide i waenga i te rohe kaiwhakahaere me te ira hanganga ka mutu te tuhi.
10. Wāhi Maama: Ka tipu te huakita ka tutaki ki te kore rawa o te waikawa amino, ka puta he urupare ohorere te huakita ki te aukati i te whakaputanga o nga ira katoa.Ko nga tohu e whakaputa ana i tenei urupare ohorere ko te guanosine tetraphosphate (ppGpp) me te guanosine pentaphosphate (pppGpp).Ko te mahi a te PpGpp me te pppGpp ehara i te mea kotahi, i etahi operon anake, engari ka pa ki te tini o ratou, no reira ka kiia ko nga tino-whakahaere, he waahi makutu ranei.
11. Huānga kaiwhakatairanga whakarunga: e pa ana ki te raupapa DNA e whai mana ana ki te mahi a te kaiwhakatairanga, penei i te TATA i te rohe -10, te TGACA i te rohe -35, nga kaiwhakatairanga, me nga attenuators.
12. Te tirotiro DNA: he wahanga kua tapaina o te DNA me te raupapa e mohiotia ana, e whakamahia whanuitia ana ki te kite i nga raupapa e kore e mohiotia me te mata ira ira.
13. Te raupapa SD: Ko te raupapa here o te ribosome me te mRNA, e whakahaere ana i te whakamaoritanga.
14. Monoclonal Antibody: He antibody e mahi ana ki te taupatupatu antigenic kotahi anake.
15. Cosmid: He mea hanga poipoitia te DNA o waho e pupuri ana i nga rohe COS i nga pito e rua o te phage me te hono ki te plasmid.
16. Te tirotiro wahi puru-ma: LacZ ira (whakawaehere i te β-galactosidase), ka taea e te enzyme te whakakorikori i te tïpako chromogenic X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) ki te whakaputa kahurangi, ka puru te riaka.Ina whakaurua te DNA o waho, kaore e taea te whakaatu i te ira LacZ, he ma te riaka, hei tirotiro i nga huakita recombinant.Ka kiia tenei ko te tirotiro puru-ma.
17. Huānga mahi Cis: He raupapa motuhake o nga turanga i roto i te DNA e whakahaere ana i te whakaaturanga ira.
18. Klenow enzyme: He kongakonga nui o te DNA polymerase I, engari ka tangohia te mahi exonuclease 5' 3' mai i te DNA polymerase I holoenzyme
19. PCR Punga: whakamahia hei whakanui i te DNA o te paanga me te raupapa e mohiotia ana i tetahi pito.I taapirihia he hiku poly-dG ki tetahi pito o te raupapa e mohiotia ana, katahi ka whakamahia te poly-dC me te raupapa e mohiotia ana hei tuatahi mo te whakanui PCR.
20. Te pūmua whakakotahi: Ko te ira o te pūmua eukaryotic e hono ana ki te ira o waho, a ko te pūmua i tito mai i te whakamaoritanga o te pūmua ira taketake me te pūmua o waho ka whakaatuhia i te wa ano.
Ētahi atu kupu koiora rāpoi
1. Ko te mapi-a-tinana o te DNA ko te raupapatanga o nga kongakonga (endonuclease-digested here) o te ngota ngota DNA.
2. Kua wehea te wehenga o RNase ki nga momo e rua (autocatalysis) me (heterocatalysis).
3. E toru nga mea timatanga i roto i nga prokaryotes ko (IF-1), (IF-2) me (IF-3).
4. Ko nga pūmua Transmembrane e hiahia ana ki te arahi (nga tohu tohu), me te mahi a nga kai-whakahaere pūmua (he awhina ki te whakakoi i te mekameka peptide ki te ahua taketake o te pūmua).
5. Ka taea te wehewehea nga huānga o roto i nga kaiwhakatairanga kia rua nga momo: (nga huānga kaiwhakatairanga matua) me (nga huānga kaiwhakatairanga whakarunga).
6. E toru nga wahanga o te rangahau o te koiora rapoi: (koiora ngota hangahanga), (whakapuaki ira me te ture), me te (hangarau whakakotahitanga DNA).
7. Ko nga whakamatautau matua e rua e whakaatu ana ko te DNA te mea ira ko (te mate pneumococcus o nga kiore) me te (T2 phage mate o Escherichia coli).pea).
8. E rua nga rereketanga nui i waenganui i te hnRNA me te mRNA: (kua honoa te hnRNA i roto i te tukanga o te huri ki te mRNA), (ko te 5' te pito o te mRNA ka taapirihia me te potae m7pGppp, a he polyadenylation ano kei te pito 3' o te hiku o te waikawa mRNA (polyA).
9. Ko nga painga o te momo-waa-maha o te pūmua he (ko te waahanga iti he tikanga ohaoha mo te whakamahi DNA), (ka taea te whakaiti i te paanga o nga hapa matapōkere i roto i te whakahiato pūmua i runga i te mahi pūmua), (ka taea te tino pai te mahi me te tere te whakatuwhera me te kati).
10. Ko te kaupapa matua o te tikanga whakakopa pūmua te ariā nucleation tuatahi ko te (nucleation), (te whakarangatiratanga o te hanganga), (te whakatikatika whakamutunga).
11. Ko te Galactose he paanga rua ki te huakita;i tetahi taha (ka taea te whakamahi hei puna waro mo te tipu o te pūtau);i tetahi atu ringa (he waahanga ano o te pakitara pūtau).Na reira, ka hiahiatia he kaiwhakatairanga motuhake cAMP-CRP-S2 mo te whakahiato tuturu i te taumata papamuri;i te wa ano, ka hiahiatia he kaiwhakatairanga S1 cAMP-CRP-tiati ki te whakahaere i te whakahiato taumata-tiketike.Ka timata te whakamaoritanga mai i (S2) me G me te (S1) kaore he G.
12. Ko te hangarau DNA Recombinant e mohiotia ana ko te (gene cloning) ranei (te molecular cloning).Ko te tino whainga (he whakawhiti i te DNA korero ira i roto i tetahi rauropi ki tetahi rauropi).Ko te nuinga o nga mahi e whai ake nei i roto i te whakamatautau whakakotahitanga DNA: (1) Tangohia te ira whainga (te ira o waho ranei) o te rauropi kaikoha, ka hono ma te enzymatic ki tetahi atu ngota ngota DNA (waahanga cloning) hei hanga i te ngota ngota DNA hou.② Ka whakawhitia te ngota ngota DNA recombinant ki roto i te pūtau kaiwhiwhi, ka tukuruatia ki te pūtau kaiwhiwhi.Ko tenei tukanga e kiia ana ko te huringa.③ Tirohia me te tautuhi i nga pūtau kaiwhiwhi kua uru ki te DNA whakahiato.④Whakatupuria nga pūtau kei roto i te DNA recombinant i roto i nga rahinga nui kia kitea mena kei te whakaputahia te ira awhina ke.
13. E rua nga momo o te tukuruatanga plasmid: ko nga mea e tino whakahaerehia ana e te whakahiato pūmua pūtau kaihautū ka kiia (te plasmids piriti), ko nga mea kaore e tino whakahaerehia e te whakahiato pūmua pūtau kaihautu ka kiia (te plasmids noho humarie).
14. Me whai i te punaha tauhohenga PCR nga tikanga e whai ake nei: a.Ko nga papa tuatahi o te DNA (e 20 pea nga turanga) me nga raupapa taapiri i ia pito o nga whenu e rua o te ira i whaaia kia wehea.b.Ko nga enzymes e mau ana te waiariki penei: TagDNA polymerase.c, dNTPd, raupapa DNA o te paanga hei tauira
15. Kei roto i te tukanga tauhohenga taketake o te PCR e toru nga wahanga: (denaturation), (annealing), me (toronga).
16. Ko te tikanga taketake o nga kararehe whakawhiti i te nuinga o te waa ko: ①Ko te whakaurunga o te ira kee ki roto i te karihi o te hua manu wairakau, te putau kakau embryonic ranei;②Te whakawhiti i te hua manu wairakau kua werohia ki roto i te kōpū wahine;③Whakaotihia te whanaketanga me te tipu o te kukune Mo nga uri whai ira ke;④ Whakamahia enei kararehe ka taea te whakaputa i nga pūmua o tawahi hei kararehe whakatipu ki te whakaputa i nga raina homozygous hou.
17. Ka hangaia nga raina pūtau Hybridoma ma te whakakotahi i nga pūtau (spleen B) ki nga pūtau (myeloma), a, na te mea ka taea e (nga pūtau kiko) te whakamahi i te hypoxanthine me te (waahanga wheua) e whakarato ana i nga mahi wehewehenga pūtau, ka taea te tipu ki te reo HAT.tupu.
18. Na te hohonutanga o te rangahau, ka kiia te reanga tuatahi o nga paturopi (polyclonal antibodies), te reanga tuarua (monoclonal antibodies), me te reanga tuatoru (inetic engineering antibodies).
19. I tenei wa, ko te hangahanga ira o nga wheori pepeke e aro nui ana ki te baculovirus, ka kitea i roto i te whakaurunga o te (ira toxin exogenous);(nga ira e whakararu ana i te huringa ora o nga pepeke);(te whakarereketanga o nga ira huaketo).
20. Ko nga take pūmua whakawhiti e rite ana ki nga huānga noa TATA, GC, me CAAT i roto i te kaiwhakatairanga RNA polymerase II mammalian ko (TFIID), (SP-1) me (CTF/NF1), ia.
rua tekau ma tahi.Ko nga take tuhi taketake o te RNA polymerase Ⅱ ko, TFⅡ-A, TFⅡ-B, TFII-D, TFⅡ-E, a ko to raatau raupapa here ko: (D, A, B, E).Ko te mahi a TFII-D kei te (here ki te pouaka TATA).
rua tekau ma rua.Ko te nuinga o nga mea tuhi e hono ana ki te DNA e mahi ana i te ahua o nga dimer.Ko nga waahi mahi o nga mea tuhi e herea ana ki te DNA ko enei e whai ake nei (helix-turn-helix), (konutai maihao), (basic-leucine) motif kumemau).
rua tekau ma toru.E toru nga momo o te herenga endonuclease cleavage aratau: (tapahia i te taha 5' o te tuaka hangarite hei whakaputa 5' pito piri), (tapahia ki te taha 3' o te tuaka hangarite hei whakaputa i nga pito piri e 3' (tapahia ki te tuaka hangarite hei whakaputa i nga wahanga papatahi) ).
rua tekau ma wha.Ko te DNA Plasmid e toru nga waahanga rereke: (SC configuration), (oc configuration), (L configuration).Ko te tuatahi i roto i te electrophoresis ko (SC whirihoranga).
25. Nga punaha whakaputa ira o waho, ko te nuinga (Escherichia coli), (Rewena), (Pepeke) me te (tepu pūtau Mammalian).
26. Ko nga tikanga e whakamahia nuitia ana mo nga kararehe transgenic ko: (te tikanga mate retroviral), (te tikanga DNA microinjection), (te tikanga embryonic stem cell).
Te Whakamahinga Molecular Biology
1. Whakaingoatia nga mahi o nga RNA neke atu i te 5?
Whakawhiti RNA tRNA Whakawhiti waikawa amino Ribosome RNA rRNA Ribosome he karere RNA mRNA Tauira whakahiato Protein Tauira RNA karihi Heterogeneous RNA hnRNA karihi Heterogeneous Heterogeneous nuclear RNA hnRNA Precursor o te mRNA pakeke RNA karihi iti snRNA Kua whai wāhi ki te hnRNA splicing Iti cytoplasmic RNA scRNA/7SL-RNA pūmua Ko te RNA RNA scRNA / 7SL-RNA te pūmua Plasmacalized reculum- syngnition tinana Plasmacalized reticulum- sygnition tinana. RNA Regulates expression ira Ribozyme RNA Enzymatically active RNA
2. He aha te rereketanga nui i waenga i nga kaiwhakatairanga prokaryotic me te eukaryotic?
Prokaryotic TTGACA --- TATAAT------Pae Whakatairanga-35 -10 Eukaryotic Enhancer---GC ---CAAT----TATAA-5mGpp-Pae Whakatairanga-110 -70 -25
3. He aha nga ahuatanga matua o te hanga horihori o nga plasmids maori?
He maha nga hapa o nga plasmid taiao, no reira kaore e pai mo te kawe hei kawe mo te mahi hangarau ira, me whakarereke me te hanga: a.Tāpirihia nga ira tohu tohu e tika ana, penei i te rua, neke atu ranei, he ngawari ki te whakamahi mo te kowhiri, ko te nuinga o nga ira paturopi.b.Whakanuia, whakaitihia ranei nga waahi tapahi whaariki e tika ana kia pai ai te whakakotahitanga.c.Whakapotohia te roa, tapahia nga kongakonga kore, whakapai ake i te kaha o te kawemai me te whakanui ake i te kaha o te uta.d.Hurihia te tauira, mai i te piri ki te mahora, mai i te iti ake o nga kape ki te maha ake o nga kape.e.Tāpirihia nga huānga ira motuhake kia rite ki nga whakaritenga motuhake o te hangarau ira
4. Homai he tauira o te tikanga mo te tirotiro rereke o te cDNA motuhake-kiko?
E rua nga taupori pūtau kua whakaritea, ko te ira whainga ka whakaatuhia, ka tino whakaatuhia ranei i roto i tetahi o nga ruma, a, karekau te ira whainga e whakaatuhia ana, ka iti ranei te whakaatu i roto i tetahi atu o nga pūtau, katahi ka kitea te ira whainga ma te whakakotahitanga me te whakataurite.Hei tauira, i te wa e tupu ana me te whanaketanga o nga pukupuku, ka whakaatuhia e nga pūtau puku nga mRNA me nga taumata korero rereke atu i nga pūtau noa.No reira, ka taea te tirotiro i nga ira e pa ana ki te puku ma te whakakotahitanga rereke.Ka taea hoki te whakamahi i te tikanga arataki ki te tirotiro i nga ira e whakaawehia ana te korero.
5. Te whakatipu me te tirotiro i nga raina pūtau hybridoma?
Ko te Spleen B cells + myeloma cells, tāpirihia te polyethylene glycol (PEG) ki te whakatairanga i te whakakotahitanga pūtau, me te splenic B-myeloma fusion pūtau tipu i roto i te reo HAT (kei roto hypoxanthine, aminopterin, T) tonu ki te whakawhānui whāngai.Kei roto i te whakakotahitanga o te pūtau: nga pūtau whakahiato-a-whare: kaore e taea te tipu, kaore e taea te whakatipu i roto i te vitro.Ko nga pūtau whakakotahi wheua: kaore e taea te whakamahi i te hypoxanthine, engari ka taea te whakahiato purine ma te ara tuarua ma te whakamahi i te reductase folate.Ka aukati te Aminopterin i te reductase folate na reira kaore e taea te tipu.Ko nga pūtau whakakotahi wheua-whare: ka tipu i roto i te HAT, ka taea e nga pūtau kikorangi te whakamahi i te hypoxanthine, me nga pūtau wheua hei mahi wehenga pūtau.
6. He aha te maapono me te tikanga mo te whakatau i te hanganga tuatahi o te DNA ma te tikanga whakamutu kapeka dideoxy (Sanger tikanga)?
Ko te maataapono ko te whakamahi i te riipene mekameka nucleotide—2,,3,-dideoxynucleotide hei whakamutu i te toronga o te DNA.Mai i te kore o te 3-OH e hiahiatia ana mo te hanganga o nga hononga 3/5 / phosphodiester, i te wa i whakauruhia ki roto i te mekameka DNA, kaore e taea te whakawhānui ake i te mekameka DNA.E ai ki te kaupapa o te takirua turanga, i nga wa katoa e hiahia ana te DNA polymerase ki te dNMP kia uru atu ki roto i te mekameka DNA whakaroa noa, e rua nga huarahi, ko tetahi ko te uru ki te ddNTP, ka mutu te toronga mekameka deoxynucleotide;ko tetahi atu ko te whakauru ki te dNTP , kia taea tonu e te mekameka DNA te toro tonu tae noa ki te whakauru i te ddNTP e whai ake nei.E ai ki tenei tikanga, ka taea te whiwhi i tetahi roopu o nga wahanga DNA rereke te roa ka mutu ki te ddNTP.Ko te tikanga ko te wehewehe kia wha nga roopu ddAMP, ddGMP, ddCMP, me ddTMP.I muri i te tauhohenga, ka taea e te polyacrylamide gel electrophoresis te panui i te raupapa DNA e ai ki nga roopu kauhoe.
7. He aha te pai o te whakaritenga o te pūmua whakahohe (CAP) ki runga i te tuhi?
Cyclic adenylate (cAMP) receptor protein CRP (cAMP receptor protein), te matatini i hangaia e te huinga o te cAMP me te CRP ka kiia ko te CAP (cAMPactivated protein).I te wa e tipu ana a E. coli i roto i te reo karekau he huka, ka piki te whakahiato o te CAP, a, kei a CAP te mahi ki te whakahohe i nga kaiwhakatairanga penei i te lactose (Lac).Ko etahi o nga kaiwhakatairanga e whakawhirinaki ana ki te CRP kaore i te ahua -35 te waahanga raupapa rohe (TTGACA) kei nga kaiwhakatairanga noa.No reira, he uaua mo te RNA polymerase ki te here ki a ia.Te aroaro o te CAP (mahi): ka taea te whakapai ake i te pumau here o te enzyme me te kaiwhakatairanga.Ko te nuinga e whakaatu ana i nga ahuatanga e rua e whai ake nei: ① Ka awhina te CAP i te ngota ngota enzyme ki te whakatika tika ma te whakarereke i te ahua o te kaiwhakatairanga me te taunekeneke ki te whaariki, kia pai ai te whakakotahi me te rohe -10 me te mahi ki te whakakapi i te mahi o te rohe -35.Ka taea hoki e ②CAP te aukati i te herenga o te RNA polymerase ki etahi atu waahi i roto i te DNA, na reira ka piki ake te tupono ka herea ki tana kaiwhakatairanga motuhake.
8. He aha nga mahi ka uru ki roto i te whakamatautau whakakotahitanga DNA?
a.Tangohia te ira (he ira o waho ranei) o te rauropi kaikoha, ka hono ma te enzymatically ki tetahi atu ngota ngota DNA (waahanga cloning) hei hanga i tetahi ngota ngota DNA hou.b.Whakawhitihia te ngota ngota DNA recombinant ki roto i te pūtau kaiwhiwhi me te tukurua me te pupuri i roto i te pūtau kaiwhiwhi.Ko tenei tukanga e kiia ana ko te huringa.c.Matamatahia me te tautuhi i nga pūtau kaiwhiwhi kua kapohia te DNA recombinant.d.Whakaahua papatipu nga pūtau kei roto i te DNA recombinant kia kitea mena kei te whakaatuhia te ira awhina ke.
9. Te hanga whare pukapuka ira E toru nga tikanga mo te tirotiro i nga recombinant ka tukuna, ka whakaahua pototia te tukanga.
Te tirotiro i te parenga paturopi, te whakauru whakaurunga o te aukati, te tirotiro i te waahi puru-ma, te tirotiro PCR ranei, te tirotiro rereke, te tirotiro DNA Ko te nuinga o nga vector whakakoi e mau ana i nga ira aukati paturopi (anti-ampicillin, tetracycline).Ina whakawhitia te plasmid ki roto i te Escherichia coli, ka whiwhi te huakita i te parenga, a ko te hunga kaore he whakawhitinga ka kore e whai parenga.Engari kaore e taea te wehewehe mena kua whakatikatikahia, kaore ranei.I roto i te vector e rua nga ira parenga, ki te whakauruhia he kongakonga DNA tawahi ki tetahi o nga ira ka kore ai te ira e kore e whakahohe, ka taea te whakamahi i nga mana pereti e rua kei roto i nga raau taero rereke hei tirotiro mo nga recombinant pai.Hei tauira, kei roto i te pUC plasmid te ira LacZ (whakawaehere i te β-galactosidase), ka taea te whakakore i te taputapu chromogenic X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) ki te whakaputa puru , na reira ka huri te riaka ki te kikorangi.Ina whakauruhia te DNA ke, kaore e taea te whakaatu i te ira LacZ, ka ma te riipene, hei tirotiro i nga huakita recombinant.
10. Whakamāramahia te tukanga taketake o te whiwhi kararehe whakawhiti i roto i nga pūtau kakau embryonic?
Ko nga pūtau kakau embryonic (ES) he pūtau embryonic i te wa o te whakawhanaketanga o te embryonic, ka taea te whakatipu me te whakanui ake me te whai mahi ki te rereke ki etahi atu momo pūtau.Te Ahurea o nga pūtau ES: Ko te papatipu pūtau o roto o te blastocyst ka wehea, ka tipuhia.Ina whakatipuhia te ES ki roto i te paparanga kai-kore, ka rereke ki roto i nga momo pūtau mahi penei i nga pūtau uaua me nga pūtau N.Ina whakatipuria i roto i te reo kei roto he fibroblasts, ka mau tonu a ES te mahi wehewehe.Ka taea e te ES te raweke ira, ka taea te whakakotahi i tana mahi rereke me te kore e pa ki tana mahi rereke, e whakaoti ana i te raruraru o te whakauru matapōkere.Whakauruhia nga ira o waho ki roto i nga pūtau kakau embryonic, ka whakatō ki roto i te kōpū o nga kiore wahine hapu, ka whanake hei poaka, ka whakawhiti kia whiwhi kiore homozygous.
