• facebook
  • hono
  • youtube

1

Mo te tangohanga RNA

E toru tekau tau ki muri, mo te tangohanga RNA, ko ta matou i whakaaro ko te huarahi noa ki te whiwhi RNA oti, heoi, kaore he whakaritenga mo te tere tangohanga (Ko te reanga tuatahi o te Hangarau te tikanga Trizol i whanau).Na te whakahoutanga o te hangarau tangohanga RNA, ko nga mea ka taea e taatau te mahi kaore i te herea ki te whiwhi hua.I te wa e pa ana ki te tangohanga o nga reagents a Trizol-whakatupuranga tuatahi, i te nuinga o te wa ka raru nga kaiwhakamatautau na te uaua o nga mahi mahi;ahakoa i muri i te maha o nga arotautanga me nga mahi hou, he roa tonu te wa.I te wa ano, me whakamahi nga reagents pararopi penei i te phenol me te chloroform i roto i nga mahi tangohanga, e whakawehi ana hoki i te haumaru o nga kaimahi e tika ana ki tetahi waahanga.

2He pai, he watea me te haumaru

Ko te rapu i tetahi hua tangohanga RNA pai, watea me te haumaru kua noho hei kaupapa tuatahi mo nga kaiwhakamatautau.Na reira, i puta mai te tikanga whakamaarama o te Tiwae Porohuri Silica mo te tangohanga RNA.Ko nga hua o te whakatipuranga tuatoru o Foregene a Foregene e tuhi ana i nga painga o nga tangohanga o nga tau tuatoru o mua.

Tutohi whakataurite tukanga mahi

3

Tutohi whakatairite hua whakamatautau

Ko te kete wehe RNA katoa o Foregene he nui te hua tangohanga RNA, he pai te ma, he pai ake te tangohanga o te miRNA i etahi atu kete tohu.

4

Electrophoresis o te 50 mg o te ate kiore te RNA katoa i tangohia e nga tikanga rereke
Ko te reanga tuatahi (1: Trizol)
Whakatupuranga tuarua (2: kete tangohanga RNA mai i te kamupene A)
Te reanga tuatoru (3: kete tangohanga RNA me te kamupene A, 4: Foregene: RNA Isolation kete)

Kauwhata qPCR (kauwhata ānau whakakaha)

Me tika te tango i te DNA genomic i te wa o te tangohanga RNA, ki te kore ka kore e taea te whakahaere i runga i nga whakamatautau o raro (te uara CT moata, nga hua teka).Ka taea e te kete reanga o muri mai te tango i te DNA genomic me te kore taapiri o te DNase, ka penapena te wa roa, me te karo i te paheketanga na te poke o te RNase o waho.
Ko te reanga tuatahi (ko te matomato he TRlzol-, he whero he TRlzol+)

5Whakatupuranga tuarua (Ko te puru he tohu kete tangohanga RNA Kamupene A -, he tohu whero te kete tangohanga RNA Kamupene A +)

6

Ko te reanga tuatoru (he kikorangi te tohu mo te kamupene He kete tangohanga RNA me te taapiri, he tohu matomato nga kete Whakawehe RNA Foregene)

7

(Tuhipoka: "_" i te kauwhata qPCR e tohu ana kaore ano kia taapirihia te DNase, kaore ano kia tangohia te poke o te DNA; "+" e tohu ana kua taapirihia te DNase, kua tangohia te poke o te DNA)

Whakaotia te tangohanga RNA i roto i te 11min

Kaore e hiahiatia mo nga tau o te kohinga wheako tangohanga waikawa karihi, ka taea e te Foregene teitei te kaha o te kohinga kete wehe RNA katoa ka taea e koe te whiwhi RNA hua nui me te parakore i roto i nga meneti 11 ki te whakatutuki i nga momo hiahia whakamatautau o raro.

9Tae noa ki tenei wa, kua mohiohia e te tini o nga kaihoko a Foregene te tapeke o te RNA isolaton kits kits, kua whai waahi ki te maha o nga tuhinga tohu-nui.Ko te tino whakamahi a te kaihoko i te tūtohi electrophoresis urupare me te kurupae whakahiato PCR ine i muri i te whakamuri whakamuri e whakaatu ana ko te RNA i tangohia ma te whakamahi i nga hua Foregene ehara i te mea he tiketike noa iho te kukū, engari he pai te tapatahi.Ko te hangarau hua anake kua whakamatauria e te maakete ka taea e te katoa te pai.

1011

Pūtau Tapeke RNA Wehewehenga Kete

Hua RNA teitei

Tere: Whakaoti RNA Wehewehenga i roto i te 11 meneti

Haumaru: Karekau he matū pararopi i tapirihia

Ko etahi o nga korero tohu-nui:

1. Yuan Fang, Zezhong Liu, Yang Qiu, et al.Ko te aukati i te aukati viral o nga pūmua RNAi e nga peptides kaihoahoa e tiaki mai i te mate enteroviral i roto i te vivo, Immunity, 54(10), 2021: 2231-2244.e6.(IF:31.745,Kete Wehenga RNA Viral, Cat No.RE-02011)

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1074761321003617

2. Ren, Y., Wang, A., Wu, D. et al.Ko te aukati rua o te mate mate me te apoptosis e te pūmua cytomegalovirus tangata UL37x1 ka taea te tukuruatanga huaketo pai.Nat Microbiol 7, 1041–1053 (2022).(IF:30.964,Pūtau Tapeke RNA Wehewehenga Kete, Cat No.RE-03111)

https://doi.org/10.1038/s41564-022-01136-6


Wā tuku: Hūrae-27-2022