Kaituhi: Wang Xiaoyan, Zhao Eryu

Waeine: Jiaozhou Hospital, Dongfang Hospital Hononga ki te Whare Wananga o Tongji

I tenei wa, ko te momo tauira matua mo te whakamohiotanga o te waikawa nucleic pathogen rewharewha ko te korokoro.He maha nga momo rongoa rongoa tauira e whakamahia nuitia ana, me whakamatao katoa, me whakatotoka ranei mo te kawe me te rokiroki;He uaua ki te whakahaere i nga mahi katoa o te iti o te pāmahana i te wa o te kohinga me te tukanga kawe, a he uaua ki te whakarite i te mana o te kounga i mua i te whakamatautau tauira.^[1-2].

Ko te RNase (RNase) he endonuclease e whakamaarama ana i te RNA, ka mutu te nuinga o nga here phosphodiester i waenga i nga nucleotides.Ko te ngota ngota RNase he tino pumau, he here disulfide kei roto i te hanganga, a, kaore e hiahiatia ana e tana mahi te aroaro o nga cation divalent, na reira kaore i te ngawari te whakakore i te RNase, a he ngawari ki te whakahou ahakoa i muri i te teitei o te wera me te whakamahinga o nga denaturants.Kua wehea nga RNases ki nga mea endogenous me te exogenous.Ka taea te tuku i nga RNases endogenous i te wa ano ka pakaru nga pūtau.Na reira, ko te whakakore i te mahi a nga RNases endogenous he mahi tino nui i roto i te tukanga tangohanga RNA.Kei te tohatoha whanui nga RNases o waho.Ko nga RNases kei te rangi, te kiri tangata, te makawe me te huware, he take nui mo te ngawari o te RNA.^[3].

Uiui Raraunga

Ko te CANS-CL02-A009 "Te tono mo te Kounga o te Taiwhanga Taiwhanga Hauora me nga Aratohu Whakaaetanga Whakaaetanga i roto i te Maatauranga o te Maatauranga Molecular" i roto i nga whakaritenga hangarau e kii ana me whakarite nga paerewa kounga wai e tika ana kia rite ki te tono;Nga ipu kaaiti karekau:

RNase / Whakaraupapa

(1) RNase A

Ko te Ribonuclease A (RNase A), i ahu mai i te pancreas bovine, he endoribonuclease ka taea te whakaeke i te pito 3' o nga toenga pyrimidine i runga i te RNA, te tapahi cytosine, te uracil ranei i hangaia e nga nucleotides tata.Ko te herenga Phosphodiester, ko te hua whakamutunga o te tauhohenga he 3′ pyrimidine nucleotide me te oligonucleotide me te 3′ pyrimidine nucleotide i te mutunga.

(2) RNase T1

Ko te Ribonuclease T1 (RNase T1) i ahu mai i te Aspergillus orjzae, ka mahi i runga i te 3'-terminal phosphate o te guanine, a ko te waahi wehenga kei waenganui i te 3' phosphate o te guanine me te 5' hydroxyl o nga nucleotides tata.Ko te hua whakamutunga o te tauhohenga ko te waikawa 3′guanylic me nga kongakonga oligonucleotide me te waikawa 3′guanylic i te mutunga.

(3) RNase H

I kitea tuatahitia a Ribonuclease H (RNase H) mai i te kiko o te kuao kau, a kua kohia tona ira whakawaehere ki te Escherichia coli.Ka taea e ia te whakaheke i te DNA: Ko nga whenu RNA i roto i nga RNA hybrid duplexes, ka puta mai he oligonucleotides me te mononucleotides me te 3'-OH me te 5'-monophosphate nga pito, kaore e taea te whakaheke i te DNA kotahi-rua-rua ranei te RNA.

RNase

Mahi me te whakamahi

Ka taea e Ribonuclease te whakakorikori i te paheketanga o te waikawa ribonucleic (RNA) ka taea te whakahiatotia.Ka whakamahia te hinu rongoa hei rongoa i te mamae me te mamae o nga hononga.E ai ki nga purongo, ka taea e ribonuclease te whakarereke i te tinana o nga pūtau kaihautu, te aukati i te whakahiatotanga huaketo, te aukati i te tipu o te rewharewha i roto i te vitro, me te aukati i te hanga o te kano kano me te huaketo herpes i roto i nga kukuna heihei.Te whakamahi haumanu o ribonuclease werohanga intramuscular ia ra o 180 mg, painga ki te maimoatanga o te urutā encephalitis, ribonuclease taea catalyze te degradation o waikawa ribonucleic (RNA), a ka taea inaianei te synthesized āwenewene.Ka whakamahia te hinu rongoa hei rongoa i te mamae me te mamae o nga hononga.E ai ki nga purongo, ka taea e ribonuclease te whakarereke i te tinana o nga pūtau kaihautu, te aukati i te whakahiatotanga huaketo, te aukati i te tipu o te rewharewha i roto i te vitro, me te aukati i te hanga o te kano kano me te huaketo herpes i roto i nga kukuna heihei.Ko te whakamahi haumanu o te ribonuclease werohanga intramuscular ia ra o 180 mg he painga mo te maimoatanga o te mate urutaru.

RNase

Te Whakamaramatanga Kaipupuri

Whakamaramatanga o te waeine aukati RNase: Ko te nui o te enzyme e hiahiatia ana hei aukati i te 50% o te mahi a 5ng RNase A he kotahi wae.

Me pehea te mahi a nga Kaipupuri RNase

Guanidine isothiocyanate:

Ko te Guanidine isothiocyanate he pūhui waro me te tātai rāpoi C2H6N4S.Te nuinga whakamahia i roto i te rongoa koiora, tauhohe matū, me ētahi atu Guanidine isothiocyanate Ko te pūmua lysing māngai, a he maha whakamahia te reira rite te wāhanga matua o te otinga lysis i roto i tauhohenga tātaritanga rāpoi.Ka taea e ia te whakaheke i te kiko, te whakangaro i te hanganga pūtau me te wehe i te waikawa nucleic mai i te nucleoprotein, a he kaha te denaturation ki te RNase.Ko te aukati RNase tino whai hua i tenei wa.

Ko te TRIzol he reagent tangohanga RNA katoa ka taea te tango tika i te RNA katoa mai i nga pūtau me nga kopa.Kei roto nga matū penei i te phenol me te guanidine isothiocyanate, ka tere te whakararu i nga pūtau me te aukati i nga karihi ka tukuna e nga pūtau.

(Heoi, he kino te guanidine isothiocyanate mo te hauora o nga kairangahau taiwhanga.)

RNasina:

Ko te glycoprotein waikawa i tangohia mai i te ate kiore, i te blastoderm tangata ranei.Ko te Rnasin he aukati whakataetae kore-whakataetae o RNase, ka taea te here ki nga momo RNases hei whakakore i a raatau.

(Mo etahi atu korero: https://www.foreivd.com/foreasy-rnase-inhibitor-product/)

High pāmahana:

Ko te pāmahana teitei he tikanga noa mo te denaturation pūmua.

Diethylpyrocarbonate (DEPC):

Ko te DEPC he kaha engari kaore i oti te aukati RNase, ka taea te aukati i te mahi RNase ma te whakakotahi me te mowhiti imidazole waikawa amino o te roopu kaha RNase ki te whakakore i nga pūmua.

Wanadil ribonucleoside matatini:

He matatini i hangaia e te vanadium oxide katote me te nucleosides, e herea ana ki te RNase i roto i te ahua o nga matū whakawhiti, ka tata te aukati i te mahi a RNase.

atu:

Ko te SDS, ko te Urea, ko te whenua diatomaceous, me etahi atu, he awe ano te aukati i te RNase.

Nga Arotake Tohunga

Li Yujie Tumuaki Hangarau

Kaiwhakahaere o te Tari Taiwhanga, Jiaozhou Hospital, Dongfang Hospital Hononga ki te Whare Wananga o Tongji

Hei aukati i te paheketanga o te RNase o waho, me mau nga kanohi kanohi, nga karapu me nga potae me te whakakapi i nga wa katoa i te wa o te tangohanga RNA.Ko nga taonga karaihe katoa me tunu ki roto i te oumu whakamaroke i te 200°C neke atu i te 2 haora.Ko nga mea e whakamahia ana mo te tunu, penei i te kirihou, me rongoa ki te wai DEPC, katahi ka horoi ki te wai matutu.Ko nga reagents me nga taputapu e whakamahia ana mo te tangohanga, te tiaki me te tautuhi i te RNA me whakatapua ki te RNA, me te whakarite i tetahi waahi mahi RNA motuhake.

tohutoro:

[1] Smith-Vaughan HC, Binks MJ, Beissbarth J, et al.Ko nga huakita me nga wheori kei roto i te nasopharynx i mua tonu i te tiimata o te mate whakapeka o raro o te manawa i roto i nga tamariki taketake o Ahitereiria[J].Eur J Clin Microbiol Infect Dis,2018,37 (9): 1785-1794.

[2] Peka Mana Mana Mate o te Hohipera o te Hainamana Preventive Medicine Association.Nga aratohu mo te kohikohi me te tirotiro i nga tauira moroiti haumanu [J].Hautaka Hainamana mo te mate o te hohipera, 2018(20):3192-3200.

[3] "Whakamātautau Haumanu Tekau Mano He aha te Rōrahi Whakamātautau Molecular Biology"