Ko te manatoko i te mahi o nga mahi tuatahi me nga rangahau i te wa tuatahi o nga reagents PCR me te whakatau i nga tikanga tauhohenga tino pai ko nga mea o mua kia pai ai te haere o nga whakamatautau okawa.
Na me pehea tatou ki te whakaū i te rangahau tuatahi i te timatanga?
Ko nga tohu matua ko te raupapa, te pihi whakakaha, te uara ct, te kaha whakakaha, te kitenga tauira iti-kumu, CV, etc.
Raina turanga
Ko te rarangi turanga ko te raina whakapae i roto i te ānau whakakaha PCR.I roto i nga huringa tuatahi o te tauhohenga whakakaha PCR, karekau e rerekee te tohu rewharewha ka hanga he raina tika.Ko tenei rarangi torotika te turanga.
I te wa e tirotirohia ana nga tirotirohanga tuatahi o te PCR, kia tupato mehemea he taumata te turanga.Ko te ma o te kukū rangahau tuatahi ka pa ki te rarangi turanga, penei ka piki, ka hinga ranei te rarangi turanga.Ko te turanga he tohu tino mohio.
Te Anau Whakanui
Ko tetahi atu tohu mohio ko te ahua o te pihi whakakaha.He pai ake te whai i te pihi S-ahua ki te karo i te whakakaha tuarua, i etahi atu pihi whakakaha rereke ranei.
Ct Uara
Ko te maha o nga huringa e rite ana ki te ira hurihuri mai i te rarangi turanga ki te tipu taupūtanga ko te uara Ct.
Mo te tauira ano, ka puta nga momo rangahau tuatahi ki nga pihi whakakaha rereke, ka pa te uara Ct e te kaha o te whakakaha me te tohu pokanoa.I roto i te ariā, ko te iti ake o te uara Ct o te rangahau tuatahi ka tohua e tatou, ka pai ake.
Te Whakanuia Pai
Ko tetahi o nga tikanga tino pono me te pumau mo te arotake i te pai o te whakakaha PCR ko te pihi paerewa, e mohiotia ana hoki e nga kairangahau.Ko te tikanga ko te hanga raupapa tauira hei whakahaere i te maha o nga tauira kua tohua.Ko enei tauira ka mahia e nga waimeha rangatū o nga rongoa kararehe kukū, ko te mea e whakamahia nuitia ana ko te dilution 10-fold.Ma te whakamahi i te raupapa o nga tauira kua waimeha, te whakamahi i te kaupapa qPCR paerewa hei whakanui kia whiwhi i te uara Cq, ka mutu te tuhi i te anau paerewa e ai ki te kukū o ia tauira me te uara Cq e rite ana ki te whiwhi i te whārite rārangi Cq= -klgX0+b, me te kaha whakakaha E=10(-1 /k)-1.I te wa e whakamahi ana i te qPCR mo te tātari ine, me noho te kaha o te whakakaha ki te 90% -110% (3.6>k>3.1).
Te Rapu Tauira Kukunga-iti
Ki te iti te kukū tauira, he rereke nga reiti kitenga o nga momo rangahau tuatahi.Ka tohua e matou kia 20 nga tauira iti-kuiti hei tukurua, a ko te punaha tirotiro tuatahi me te reiti kitenga teitei te mea pai rawa atu.
Tauwehenga Rerekētanga (CV)
10 nga tauira taarua ka kitea me nga momo rangahau tuatahi i runga i te paerewa raina o te reagent mo te kitenga whakakaha waikawa karihi.
Reagents Ine:
Tika
Ko te tika i roto i te puranga kotahi me tutuki: ko te whakarea o te rereketanga (CV,%) o te uara arorau o te kukū whakamatautau he ≤5%.Ina he iti te kukū tauira, ko te whakarea o te rerekētanga (CV,%) o te logarithm o te kukū kitea he ≤10%
Reagents kounga:
Tika
Me tutuki te tika i roto i te puranga kotahi:
(1) Te whakarea o te rereketanga o te uara Ct (CV,%) ≤5%
Ko te tauira ano ka whakamatauria i roto i te whakarara mo nga wa 10, a me rite nga hua whakamatautau
Wā tuku: Sep-18-2021
