Kei te whakamahi tonu koe i a Trizol hei tango i te RNA?
Aue, kaua ahau e manukanuka ki to hauora!
Kua tata te whakahekehia a Trizol, kaua e kii mai kei te pouri tonu koe?

Ko te waahanga matua o te reagent Trizol ko te phenol, ka taapirihia ano nga reagents waro penei i te chloroform i roto i te mahi whakamatautau.Ko te rongo mo te wa roa ka pa he kino ki to hauora, ina koa ko te whakapiri tika ki te kiri ka pa mai te weranga matū nui me nga whiu mau tonu.

I raro i nga ahuatanga noa, ka taea e nga hoa taiwhanga te whakaiti noa i nga aitua ma te mau patu i a ratou ano (ka mau i nga koti taiwhanga, nga karapu me nga kanohi kanohi).

A ko taku tohutohu ki a koe: tena koa whakakapihia a Trizol kia kore ai e kino mai i te puna.

1. Ko te hua reanga tuatahi o te tangohanga RNA
Ka puta mai i te tau 1987 (Trizol reagents)

painga:
He tangohanga oti atu

Nga ngoikoretanga:
Ko nga reagents paitini penei i te guanidine isothiocyanate-phenol-chloroform e hiahiatia ana;
Te mahi uaua;
Me whakamahi te DNase ki te tango i te poke DNA

2.Ko te hua o te reanga tuarua o te tangohanga RNA
Ka puta mai i te tau 1994 (QIAGEN RNeasy me te nuinga o nga hua o roto)

painga:
Ka whakamahia te tikanga centrifugal tīwae, he ngawari ki te whakahaere;

Raruraru:
Me whakahiatohia ki te tango i nga otaota kiko
Me whakamahi te DNase ki te tango i te poke DNA

3.Ko te hua tuatoru o te tangohanga RNA
Ka puta mai i te tau 2005 (QIAGEN RNeasy Plus me ForegeneNga hua raupapa purenga RNA)

painga:
Whakamahi tika i te pou tango DNA ki te tango i te DNA me nga otaota kiko i te wa ano, ka penapena te wa me te whakapau kaha;
He haumaru me te watea, kaore he take ki te taapiri i te pou tātari me te DNase kia ngawari te tango i nga poke me te karo i te poke DNA

Kia titiro tatou ki nga rereketanga mahi i waenga i te hua whakatipuranga tuatahi (Trizol), te hua whakatipuranga tuarua (RNeasy) me te hua whakatipuranga tuatoru (Foregene) o te tangohanga RNA:

Ko te mahi i roto i te ahua he maamaa: ko te hua tuatoru-whakatupuranga he tino painga

E toru noa nga kupu hei whakaahua: ngawari!Tere!Haumaru

Te tūtohi PK o ngā hua whakamātaumonga reanga tuatahi, reanga tuarua me nga reanga tuatoru nga hua o te tangohanga RNA:

1. Electrophoretogram

Ko te reanga tuatahi (1: Trizol)
Te reanga tuarua (2:QIAGEN RNeasy)
Ko te reanga tuatoru (3: QIAGEN RNeasy tāpiri, 4: Foregene)

He aha te momo hua pai, ka mohio koe ma te whakataurite
I tangohia te RNA ma te whakamahi i te kete Foregene
Ehara i te mea ko te kukū tiketike anake engari he pai hoki te tapatahi

Kauwhata 2.qPCR (kauwhata ānau whakakaha)

Ko te reanga tuatahi (Trizol)

Ko te reanga tuarua (rangirangitikangaQIAGEN RNeasy-, wherotikangaQIAGEN RNMaamaa +)

Ko te reanga tuatoru (ko te puru te tikanga o Foregene, te tikanga kakariki ko QIAGEN RNeasy me)

(Tuhipoka: Ko te reanga tuarua o QIAGEN RNeasy o te kauwhata qPCR ko te tikanga kaore te kete e taapiri i te DNase me te kore e tango i te parahanga DNA. Na reira, he teitei ake te CT me te kore e tika te hua; QIAGEN RNeasy + ko te tikanga kua taapirihia te DNase me te tango i te poke DNA, a he tika te hua)

Ahakoa he electrophoregram, he kauwhata punua PCR whakakaha ine ine, kare te kounga o nga hua o Foregene i iti iho i nga hua o tawahi.