Nga waahanga lncRNA:

1. He roa ake nga lncRNA, me te whakaputanga hihiri me nga tikanga mokowhiti rereke i te wa rereke;

2. Ka whakaritea ki nga ira tohu, he iti ake te lncRNA;

3. Ko te nuinga o nga lncRNA e kitea ana te ahua o te waahi me te waahi mokowhiti i roto i te tukanga o te rereketanga me te whanaketanga o te kiko;

4. He tohu tohu kei roto i nga pukupuku me etahi atu mate;

5. He kanorau nga waahi o raro o te lncRNA;

6. He iti te raupapa i roto i te tiaki, engari ko te mahi he tohu o te tiaki me etahi atu.

LncRNA otinga whakawhiti whakamuri:

E mohio ana matou he hanganga taumata teitei te lncRNA i roto i nga pūtau.Ko enei RNA he maha nga hanganga uaua penei i nga koroka kakau me nga makawe makawe.Ki te kore e taea te whakaoti pai te hanganga tuarua o te lncRNA, karekau he angitu, he kore angitu ranei i te mahi RT-qPCR.Ko te raruraru o te kaha iti.

Ko te tikanga, e toru nga kaupapa matua kia whiwhi tatou i nga tauira cDNA kounga teitei:

Ko te kounga o te tauira RNA, ko nga tuhinga tuatahi o te tuhinga whakamuri me te whakamuri transcriptase, ko te whakamuri transcriptase te take matua.Ko te RNA kua purea e nga reagents tangohanga RNA e whakamahia ana he maha nga toenga o te waipiro me te tote guanidine, he kaha te aukati i te nuinga o nga tuhinga whakamuri;mena he iti te pāmahana tino pai mo te tauhohenga whakamuri transcriptase, kaore e pai ki te RNA.Te whakatuwheratanga o te hanganga hierarchical.

I tenei wa, ko te pāmahana e tika ana mo te whakamuri transcriptase e whakamahia ana i te nuinga o nga taiwhanga ko te 42°C te tikanga, ka eke ki te 50°C.Ko te tikanga, ko te whakatuwheratanga o te hanganga RNA teitei ake e hiahia ana kia teitei ake te pāmahana.

Ko te pāmahana mo te whakahiato i te cDNA tuatahi o Fortune Biotech 2 × RT Easy TM Mix he rite ki te 50 ℃-65 ℃, e pai ana ki te tino wetewete i te hanganga taumata teitei o te lncRNA, a he poto te wa mahi.

I tua atu, he kaha ano te kaha o te hua mo te RNA me te toenga o te waipiro me te tote guanidine, ka taea te whakatutuki i nga hiahia o nga taiwhanga ki te whakatutuki i te pai o te tuhi whakamuri.

Te Waea Tuatahi cDNA Synthesis Kit

Nama Nama: RT-01011 (25 wa)

Āhuatanga:

1. Pumau ngaariki: 65 ℃ he pai tonu te mahi whakawhiti whakamuri, e awhina ana ki te whakatuwhera i te hanganga tuarua matatini.

2. Whakaaetanga: Ka taea tonu te whakahiato cDNA ki runga i nga tauira RNA he iti te parakore (te warowaiwa me nga toenga tote guanidine)

3. Tere: mahi ngawari, ka taea te whakaoti i te whenu tuatahi cDNA synthesis i roto i te 25-35 meneti

Nga tono o raro: PCR, qPCR, RACE, tapanga maramara, hanga whare pukapuka, aha atu.

I tua atu, ka whakaratohia e FJ Biotech he huinga katoa o nga otinga RT-PCR hei whakatutuki i nga hiahia o nga momo kaihoko, tae atu ki nga kete e whai ake nei:

Kete Whakakotahitanga cDNA Tuatahi (Mo te qPCR)

Nama Nama: RT-01021 (50 wa)

Āhuatanga:

1. He waatea: Kua taapirihia nga tuhinga tuatahi ki te whakamuri kia ngawari ake te mahi

2. Pumau ngaariki: 65 ℃ he pai tonu te mahi whakawhiti whakamuri, e awhina ana ki te whakatuwhera i te hanganga tuarua matatini.

3. Whakaaetanga: Ka taea tonu te whakahiato cDNA ki runga i nga tauira RNA he iti te ma

4. Te Maamaa: e tika ana mo nga tauira RNA iti-kuiti

Te tono ki raro: Kua whakaritea mo te qPCR ka whai ake

Kotahi-taahiraa RT-PCR kete

Nama Nama: RT-02011 (100 wa)

Āhuatanga:

1. Pumau ngaariki: 65 ℃ he pai tonu te mahi whakawhiti whakamuri, e awhina ana ki te whakatuwhera i te hanganga tuarua matatini.

2. Whakaaetanga: Ka taea tonu te whakahiato cDNA ki runga i nga tauira RNA me te kore parakore.

3. Tauwhāititanga: Ko te PCR MIX kua oti te whakapai ake i te kaha whakakaha me te motuhake o te tauhohenga.

Nga tono whakararo: te whakamaarama cDNA, te whakamatautau ira me etahi atu whakamatautau ngota

He kete RT-PCR rua-taahiraa

Nama Nama: RT-02021 (100 wa)

Āhuatanga:

1. He ngawari me te tere: tauhohenga ngongo kotahi

2. Pumau ngaariki: 65 ℃ he pai tonu te mahi whakawhiti whakamuri, e awhina ana ki te whakatuwhera i te hanganga tuarua matatini.

3. Tauwhāititanga: Ko te taapiri Foregene Taq ka pai ake te pai o te whakakaha me te motuhake o te tauhohenga.

Nga tono whakararo: nga whakamatautau irapo penei i te whakamatautau ira

Kotahi-taahiraa RT-qPCR kete-SYBR Green I

Nama Nama: RT-02111 (100 wa)

Āhuatanga:

1. He ngawari: tauhohenga ngongo kotahi

2. Te tairongo teitei: ka kitea nga tauira kape iti

3. Hototahi: e tika ana mo te nuinga o nga taputapu ine ine korakora

Nga tono whakararo: te kitenga o nga tauira RNA tohu penei i nga pūtau me nga wheori

Kotahi-taahiraa RT-qPCR kete-Taqman

Nama Nama: RT-02131 (100 wa)

Āhuatanga:

1. Tere: kitea te ira i whäia

2. Te tairongo teitei: ka kitea nga tauira kape iti

3. Hototahi: e tika ana mo te nuinga o nga taputapu ine ine korakora

Nga tono whakararo: te kitenga o nga tauira RNA tohu penei i nga pūtau me nga wheori
Ka taea e Forge Bioreverse Transcription Kit te awhina pai ake i a koe ki te whakaoti rapanga o te tuhi whakamuri.I te wa ano, ka mahi tahi me te Forge Bio RNA Extraction Kit (ka taea te tango i nga toenga DNA) hei whakarato ki a koe he otinga whakamatautau RNA.