I roto i nga tau tekau kua pahure ake nei, kua tere te tipu o te hangarau whakatika ira i runga i te CRISPR, a kua pai te tono ki te maimoatanga o nga mate ira me te mate pukupuku i roto i nga whakamatautau haumanu tangata.I te wa ano, ka paopao nga kaiputaiao huri noa i te ao ki nga taputapu hou hou me te kaha ki te whakatika ira ki te whakaoti rapanga o nga taputapu whakatika ira me nga whakatau.

I te marama o Hepetema 2021, ka whakaputahia e te roopu a Zhang Feng tetahi pepa i roto i te hautaka Pūtaiao [1], a ka kitea he maha nga momo transposters e tohu ana i te RNA e arahi ana i nga enzymes waikawa karihi ka tapaina ko te punaha Omega (tae atu ki te ISCB, ISRB, TNP8).I kitea ano e te rangahau ko te punaha Omega e whakamahi ana i tetahi waahanga o te RNA hei arahi i te tapahi DNA rua mekameka, ara ko ωRNA.Ko te mea nui, he iti rawa enei enzyme waikawa karihi, tata ki te 30% o te CAS9 anake, ko te tikanga tera pea ka tukuna atu ki nga ruma.

I te Oketopa 12, 2022, i whakaputaina e te roopu a Zhang Feng i roto i te hautaka Nature e taitara ana: Structure of the Omega Nickase ISRB in Complex with ωrna and Target DNA [2].

I tātarihia ano e te rangahau te hangahanga karu irahiko tio o ISRB-ωRNA me te matatini DNA whainga i roto i te punaha Omega.

Ko te ISCB te tupuna o CAS9, a ko ISRB te mea kotahi mo te kore o te rohe HNH nucleic acid o ISCB, no reira he iti ake te rahi, he 350 noa nga waikawa amino.Ko te DNA ano hoki te turanga mo te whanaketanga me te whakarereketanga miihini.

Ko te IsrB aarahi a RNA he mema o te whanau OMEGA i whakawaeheretia e te IS200/IS605 superfamily o transposons.Mai i te tātaritanga phylogenetic me te tiritiri i nga rohe ahurei, ko te IsrB pea te tuumua o IscB, ko te tipuna o Cas9.

I te marama o Haratua 2022, i whakaputaina e Cornell University's Lovely Dragon Laboratory he pepa i roto i te hautaka Pūtaiao [3], he tātari i te hanganga o IscB-ωRNA me tana tikanga tapahi DNA.

Ka whakatauritea ki a IscB me Cas9, karekau a IsrB i te rohe karihi HNH, te REC lobe, me te nuinga o nga waahanga PAM raupapa-whakawhitiwhiti, no reira he iti ake te IsrB i te Cas9 (mo te 350 noa nga waikawa amino).Heoi, ko te iti o te IsrB ka tauritehia e tetahi RNA kaiarahi ahua nui (ko tana omega RNA he 300 nt te roa).

I wetewetehia e te roopu a Zhang Feng te hangahanga karu hiko cryo-electron o IsrB (DtIsrB) mai i te huakita anaerobic makuku-wera Desulfovirgula thermocuniculi me tona matatini o te ωRNA me te DNA whaainga.Ko te tātaritanga o te hanganga i whakaatu ko te hanganga whanui o te pūmua IsrB i tiritiri he hanganga tuara ki te pūmua Cas9.

Engari ko te rereketanga ko te Cas9 e whakamahi ana i te REC lobe ki te whakahaere i te tohu tohu, i te wa e whakawhirinaki ana a IsrB ki tana ωRNA, ko tetahi waahanga e hanga ana i te hanganga-toru-toru e rite ana ki te REC.

Kia pai ake te mohio ki nga huringa hanganga o IsrB me Cas9 i te wa o te whanaketanga mai i RuvC, ka whakatauritehia e te roopu a Zhang Feng nga hanganga here-aNA o RuvC (TtRuvC), IsrB, CjCas9 me SpCas9 mai i Thermus thermophilus.

Ko te tātaritanga hanganga o IsrB me ona ωRNA e whakamarama ana me pehea te mohio tahi a IsrB-ωRNA ki te tarai i te DNA whaainga, me te whai take ano mo te whakawhanaketanga me te miihini o tenei karihi iti.Ko te whakataurite ki etahi atu punaha aratakina e RNA e whakaatu ana i nga taunekeneke mahi i waenga i nga pūmua me nga RNA, e ahu whakamua ana to maatau mohio ki te koiora me te whanaketanga o enei punaha kanorau.

Hononga:

1.https://www.science.org/doi/10.1126/science.abj6856

2.https://www.science.org/doi/10.1126/science.abq7220

3.https://www.nature.com/articles/s41586-022-05324-6