Kia pehea te nui o to mohio

Mō Ntangohanga waikawa ucleic

Te timatanga me te mutunga o te waikawa nucleic pure

He uaua nga mea katoa i te timatanga, ko te waikawa nucleic te mea tino pai

Te timatanga o nga whakamatautau irapoi, mo nga whakamatautau ka whai ake

Ko te angitu, te rahunga ranei he paanga nui.

Ko te hikoi / ultra-trace UV spectrophotometer e paingia ana e te maha o nga kairangahau putaiao na te mea ka taea e ia te kite i te kukū o te waikawa karihi me nga toenga katote me te tote i te ngawari, tere me te ohanga.

E mohio ana tatou katoa, ko te A260 te tikanga o te waikawa nucleic absorbance OD uara, A280 te tikanga o te uara OD te kukū o te pūmua, te A230 te tikanga o te tote katote kukū absorbance OD uara, no reira ka taea e A260 te huri i te kukū waikawa nucleic, A260/280 te tikanga o te toenga pūmua, A260/230 te tikanga o te toenga katote tote i runga i te tikanga, engari he nui noa iho nga hua o te rangahau.tikanga” ki te whakapono ka taea e ia te whakamarama i te ma o te DNA me te RNA kitetahi whānuitanga.Ehara i te mea ko te paerewa anake mo te tautuhi i te hua o te waikawa nucleic me te ma, ka whakamahia noa hei tohutoro, a ehara i te "paerewa koura".

Ko te pukapuka Thermo Fisher ND-2000 e whakanui ana i te pono o nga hua whakamatautau

Ko te take ko nga hua i puta ma te whakamahi i te micro/ultramicro UV spectrophotometer anake e whakaatu ana i te hua me te ma o te waikawa karihi mai i te taha, a he maha nga mea whakaawe (ara whatu, rōrahi tauira, kukū tauira, uara pH, etahi atu katote e pa ana ki te ine inenga, me etahi atu), kaore i te tino tika te uara OD ine.I te wa ano, na te kore o te motuhake o te rauemi whakatau uara absorbance, te DNA kotahi-pae, te DNA-rua, te RNA, te dNTPs, me etahi o nga pūmua kei nga tihi absorption katoa i te roangaru 260nm, a ko te kukū e whakatauhia ana e A260 anake ehara i te tino DNA, RNA ranei.Kaore e taea te whakatau i te aro, me tona pono me te whakahekenga.

Na me pehea te whakatau i te kounga o to tatou waikawa karihi parakore?I tua atu i te whakamahi i te micro/ultramicro UV spectrophotometer mo te rapunga, ka hiahiatia ano nga tikanga penei i te electrophoresis gel agarose hei whakaatu kanohi i te ma me te tika o te waikawa karihi, me te tohu i te kukū ki tetahi whānuitanga.Ma tenei ara, ka pono te hua o te waikawa nucleic me te ma i nga kitenga o nga momo tikanga.

Whakataurite tūtohi whakamātautau

I tangohia te DNA genomic o nga pūtau H1299 ma te whakamahi i nga kete Tangohanga DNA a te kamupene A, a ka kitea te pokenga nui o te poke, ka hua he uara OD teitei.

(Uara inenga OD me te electropherogram rite)

Taupū Aromātai

He "paerewa koura" mo te tuku waikawa karihi me te whakamatautau kounga?

Ki ta maatau e mohio ana, kaore he tikanga ngawari, tere me te utu.Ahakoa he spectrophotometer, he electrophoresis gel, he spectrometry papatipu ranei, ka whakaata katoa ratou i te kukū me te ma o te waikawa karihi i roto i te otinga mai i nga ahuatanga rereke, me whakatau ma te korero tetahi ki tetahi.

Ko te taurangi arotake pai i nga wa katoate tono whakamatautau whai muri.Kaore e pa ki te kaha o te whakamaoritanga whakamuri me te whakanui PCR.Ko te whiwhi i nga hua whakakaha pono me nga uara Ct, me te whiwhi i te raupapa oti ma te raupapatanga he tangohanga waikawa karihi angitu.

Hei whakarāpopototanga, me whakawerohia te tirohanga o te ariā ōwehenga-anake e te tirohanga o te “whakamahinga pai o nga hua whakamtau o raro hei tawhā tangohanga pai”!

Ko nga kete tangohanga RNA Foregene DNA e taunakihia ana kia pai te purenga DNA/RNA:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/