Ko te tauwehenga iti o te A260/A230 ka puta mai i nga poke me te roangaru absorption teitei i te 230nm.Kia kite tatou he aha enei mea poke:

• Parahanga noa	Te roangaru whakauru	Pānga ōwehenga
  Pūmua	~230nm me te 280nm	Ko te whakaheke i te wa kotahi o A260/A 280me A260/A 280ōwehenga
  Te tote Guanidine	220-240 nm	Whakaitihia te A260/A 280ōwehenga
  Phenol	~270nm	-
  Trizol	~230nm me te 270nm	Whakaitihia te A260/A 280ōwehenga
  EDTA	~230nm	Whakaitihia te A260/A 280ōwehenga
  Ewaro	230-240 nm	Whakaitihia te A260/A 280ōwehenga

 
 
 
Te roangaru whakauru me te uara rereke o nga parahanga noa

Ppoke rotein
Ko te parahanga pūmua ka kiia ko te parahanga noa i roto i te tukanga tangohanga waikawa karihi.He pūmua kei waenganui i te wahanga wai o runga me te taha o raropararopiwahanga.Ka whakaitihia e te parahanga te ōwehenga o A260/A280 me A260/A230 i te wa kotahi, a ka tino rerekee te ōwehenga o A260/A230 i te ōwehenga o A260/A280.
I te wa o muri maiwhakawhiti whakamurior tauhohenga qPCR, Ka taea e nga toenga pūmua te aukati, te whakararu ranei i te mahi o te enzyme.Ko te huarahi pai ki te karo i te poke o te pūmua ko te maumahara ki te kaupapa "he iti ake i te nui ake, he iti noa nga wa maha" i te wa e aspirating ana te supernatant.

2. Parahanga Guanidinium
Ko te hydrochloride (GuHCl) me te guanidine thiocyanate (GTC) he painga ki te whakaheke i nga pūmua, ka tere te whakangaro i nga kiriuhi pūtau i te wa o te tangohanga waikawa karihi, ka puta te denaturation pūmua me te rerenga.Ko te roangaru absorption o GuHCl me GTC kei waenganui i te 220-240 nm, me teKo te toenga o te tote guanidinium ka whakaiti i te ōwehenga o A260/A230.Ahakoa te toenga o te tote guanidinium ka whakaiti i te ōwehenga,he iti noa te paanga ki nga whakamatautau o raro.

3. Trizol poke
Ko te waahanga matua o Trizol ko te phenol.Ko te mahi matua o te phenol he whakangao i nga pūtau me te tuku pūmua me nga matū waikawa karihi ki roto i nga pūtau.Ahakoa ka taea e te phenol te whakakore i nga pūmua, kaore e taea te aukati i te mahi RNase.Na reira, ko te 8 -hydroxyquinoline, guanidine isothiocyanate, β-mercapptoethanol, me etahi atu ka taapirihia ki te TRIzol hei aukati i te RNase endogenous me te exogenous.
I te wa e tango ana i te RNA pūkoro, ka taea e Trizol te whakaheke tere i nga pūtau me te aukati i te karihi i tukuna mai i nga pūtau, a ko te toenga o te Trizol ka tino whakaitihia te ōwehenga o A260/A230.
Tikanga Tukatuka: A, no te centrifuging, me tohu ko te phenol i Trizol he ngawari te whakarewa i te waahanga wai i raro i te ahua o te 4° me te pāmahana rūma.

4. Te toenga waihā
Ka whakamahia te Ethanol i roto i te tukanga whakamutunga ki te whakaheke i te DNA i te wa e whakakore ana nga katote tote ka herea ki te DNA.Te roangaru absorption o te teiteitihi absorption okei te 230-240 nm hoki te waihano, eka whakaiti hoki i te ōwehenga o A260/A230.
Ko te tikanga mo te karo i te toenga waihano ka taea te tukurua kia rua i roto i te elution whakamutunga, ka pupuhi i roto i tekohu haumo nga meneti e rua kia tino whakaeto te waihano i mua i te taapiri i te parepare mo te elution.
Engari, me mohio ko te tauwehenga he tohu aromatawai anake o te kounga RNA.Mena ka tino whakatauhia nga mahi kua whakahuahia ake nei, ko te rereke i waenga i te tauwehenga me te awhe paerewa ka kore e whai paanga nui ki nga whakamatautau o raro.
Hua e Pa ana:
Kararehe Tapeke RNA isolation kete
Tipu Tapeke RNA Wehewehenga kete
Pūtau Tapeke RNA Wehewehenga kete
Tipu Tapeke RNA Wehewehe kete Plus