Mo nga utu hoko whakataetae, e whakapono ana matou ka rapu koe i tawhiti me te whanui mo nga mea katoa ka taea te patu ia matou.Ka tino kii matou ma te tino pai mo enei utu ko matou te mea iti rawa atu mo te Utu wheketere mo te Ffpe Rna Kit mo te Wetewete Waikawa Nucleic me te Kete Purification, Ko te waatea tonu o nga hua reanga nui me nga otinga i roto i te whakakotahitanga me o maatau ratonga i mua i muri i te hokonga ka tino kaha te whakataetae i roto i te maakete o naianei.
Mo nga utu hoko whakataetae, e whakapono ana matou ka rapu koe i tawhiti me te whanui mo nga mea katoa ka taea te patu ia matou.Ka tino kii matou mo te tino pai mo enei utu ko matou te mea iti rawa atuHaina Rna/DNA Tangohanga Pure me te Wehenga Waikawa Nucleic, Ma enei tautoko katoa, ka taea e matou te mahi ki nga kaihoko katoa me te hua kounga me te tuku i te waa me te tino kawenga.I te mea he kamupene whakatipu rangatahi, ehara pea i te mea pai rawa atu, engari kua whakapau kaha matou ki te noho hei hoa pai mo koe.
Pukapuka Tohutohu:Tipu Tapeke RNA Isolation Kit Tāpiri Tohutohu

Mo nga utu hoko whakataetae, e whakapono ana matou ka rapu koe i tawhiti me te whanui mo nga mea katoa ka taea te patu ia matou.Ka tino kii matou ma te tino pai mo enei utu ko matou te mea iti rawa atu mo te Utu wheketere mo te Ffpe Rna Kit mo te Wetewete Waikawa Nucleic me te Kete Purification, Ko te waatea tonu o nga hua reanga nui me nga otinga i roto i te whakakotahitanga me o maatau ratonga i mua i muri i te hokonga ka tino kaha te whakataetae i roto i te maakete o naianei.
Utu wheketere MoHaina Rna/DNA Tangohanga Pure me te Wehenga Waikawa Nucleic, Ma enei tautoko katoa, ka taea e matou te mahi ki nga kaihoko katoa me te hua kounga me te tuku i te waa me te tino kawenga.I te mea he kamupene whakatipu rangatahi, ehara pea i te mea pai rawa atu, engari kua whakapau kaha matou ki te noho hei hoa pai mo koe.

I mono te pou

I muri i te whakapiringa o te pou, ka heke te hua RNA, ka kore ranei e taea te pure i te RNA, a he iti te papatipu RNA kua riro.

Te tātari take noa:

1. Ko nga wehenga tauira kaore i tino rite.

Ko te pakaru o te tauira karekau e tino arai i te TAI WHAKAMAHI ADN, ka pa ki te hua me te kounga o te RNA.Ka tūtohu matou ki te mahi huri tere i roto i te hauota wai rawaka ina wahia e koe nga tauira, Whakamātauria ki te kuru i te tauira pakitara pūtau, kiriuhi pūtau me etahi atu kiko.Mo nga tauira tipu o te polyol polysaccharides, e taunaki ana matou kia whakamahia e koe te Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

2. I te wa e momi ana te tauira hupa kua wehea me te Tiwae Whakapai-Ana, ka taea te ngongo i te rerenga pakaru o te pūtau.

Ko nga parataiao kua pakaruhia nga pūtau ka tangohia ka araia te Tiwae RNA-ONLY ka mahia ana te mahi RNA adsorption (tirohia te taahiraa 6).Ka tūtohu kia tupato koe i te wa e ngotea ana tenei supernatant kia kore ai e ngotea nga otaota pūtau.

3. He nui rawa te nama tuatahi.

Ko te nui o te whakamahi tauira ka hua mai he wehenga tauira kore oti, he lysis pūtau kore ranei na Buffer PSL1, ka mutu te aukati i te pou purenga i te wa e purea ana.Tipu Tapeke RNA Isolation Kit Ko ia tauira mahi kua purea he 50 mg.Mo nga tauira tipu o te polysaccharides polyol, e taunaki ana matou kia whakamatau koe i te Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

4. He iti rawa te mahana o te centrifuge.

Ko te wehenga RNA katoa me te mahi purenga ka mahia i te pāmahana rūma (20-25°C), engari ko te kiko tauira ka pakaruhia e te hauota wai. Ko te pāmahana o etahi centrifuges cryogenic he iti iho i te 20℃, ka raru pea te Tiwae Whakapai DNA me te Tiwae RNA-anake/ranei.Mena ka puta tenei, tautuhia te pāmahana centrifuge ki te 20-25℃, aMe mohio kua whakamahana te ranunga lysis me/ranei te supernatant kua taapirihia ki te waihano ki te 37°C.

Kaore he RNA i tangohia, he iti ranei te hua RNA

He maha nga mea e pa ana ki te kaha o te whakaora, penei i te: tauira ihirangi RNA, tikanga mahi, te rōrahi elution, etc.

Te tātaritanga o nga take noa penei i raro nei:

1.I mahia he pati hukapapa iti ranei (4°C) centrifugation i te wa o te mahi.

Huatau: Mahi i te pāmahana rūma (15-25°C) i roto i te tukanga katoa, e kore e mahi i te tio pati me te iti pāmahana centrifugation.

2.Ko te RNA kua whakahekehia na te kore e tika te tiaki i te tauira, te tiakitanga roa ranei o te tauira.

Taunakitanga: Ko nga tauira katahi ano ka kohia me tere whakatotoka ki roto i te hauota wai, katahi ka rongoa ki te -80°C mo te wa roa, karohia te tio me te rewa o nga tauira;ka ruku tonu ranei nga tauira ki roto i te otinga RNA stabilizer RNAlater (tauira kararehe).

3.Ko te iti o te wehenga tauira me te lysis e arai ana ki te aukati i te pou purenga.

Huatau: I te wa e huri ana i te kiko, me whakarite kia tika te oneone, ka tere te whakawhiti ki te Buffer PSL1 kua oti te whakarite (whakapumauhia kua taapirihia te waahanga tika o te β-ME, tirohia te taahiraa 1 o te mahi).

4. I hē te whakaurunga o te eluent.

Huatau: Me mohio kei te maturuturu te RNase-Free ddH2O ki waenganui o te kiriuhi o te pou purenga.

5.Ko te rōrahi tika o te waihā pūmau kīhai i tāpirihia ki Buffer PSL2, Buffer PRW2 rānei.

Huatau: Whaia nga tohutohu, taapirihia te rōrahi tika o te waihā tino pūmau ki te Buffer PSL2 me te Buffer PRW2 ka uru pai i mua i te whakamahi i te kete.

6.Ko te nui o te tauira kiko kaore e tika.

Huatau: Whakamahia te 50 mg o te kiko mo te 500 μl o Buffer PSL1.Ma te nui rawa o te kiko ka whakaiti i te nui o te RNA ka tangohia, ka heke hoki te ma o te RNA ka puta.Ka tino taunaki matou kia kaua e neke ake te inenga tauira tuatahi i te 50 mg mo ia mahi tangohanga RNA.

7. Kore te rōrahi elution kore ranei.

Huatau: Ko te 50-200 μl te rōrahi eluent o te tīwae pure;Mena kaore i te pai te paanga o te elution, ka tūtohu kia roa te wa i te pāmahana rūma i muri i te taapiri i te RNase-Free ddH2O kua whakamahana, penei i te 5-10min.

8.Ko te tīwae purenga he toenga waihā i muri i te horoinga me te BufferPRW2.

Huatau: Mena ka whakahiahia te ngongo kau mo te 1 min, kei te toe tonu te waihano i muri i te horoinga i roto i te Buffer PRW2, ka taea e koe te whakanui ake i te wa o te centrifugation ngongo kau ki te 2 min, ka waiho ranei i te pou purea ki te pāmahana rūma mo te 5 min ki te tango katoa i te toenga waihā.

9.I he te whakamahi i te kete.

Huatau: Mo nga tauira tipu o nga polysaccharides polyphenolic, ma te whakamahi i nga kete noa penei i te Plant Total RNA Isolation Kit kaore pea e taea te tiki tauira RNA pai.Ka tūtohu matou kia whakamahia e koe te Plant Total RNA IsolationKit Plus, he mea hanga motuhake mo nga tauira tipu polyphenolic polysaccharide.He kete i hangaia mo te tango RNA mai i nga tauira tipu polyphenol me te polysaccharide.

He iti te uara OD260/OD280

Ko te whakamaaramatanga RNA me te ddH2O ka whakamahia mo nga panui spectrophotometer ka iti nga uara OD260/OD280.Ka tūtohu mātou ki te whakamahi i te 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (kaore i te RNase-Free ddH2O ki te whakakore i te RNA) ki te whiwhi i nga uara OD260/OD280 tino tika, tirohia te "RNA Concentration and Purification Assays" i te wharangi 19.

Ka whakahekehia te RNA kua purea

Ko te kounga o te RNA kua purea e pa ana ki nga mea penei i te tiaki tauira, te poke RNase, me te raweke.

Te tātari i nga take noa:

1.Ko nga tauira o te kikokiko kaore i te rongoa i te wa i muri i te kohinga.

Taunakitanga: Ki te kore e whakamahia nga tauira kiko i te wa i muri i te kohikohinga, penapenahia ki roto i te hauota wai i te pāmahana iti tonu, whakawhitia ranei ki te -80°C mo te rokiroki mo te wa roa i muri i te mīti tere ki roto i te hauota wai, ka rukuhia ranei nga tauira ki te otinga RNA stabilizer RNAlater solution (tauira kararehe).Mo te tangohanga RNA, ngana ki te whakamahi i nga tauira kiko kohi hou.

2.Te whakamaroke me te whakamaroke o nga tauira kiko.

He whakaaro: I te wa e penapena ana i nga tauira kiko, he pai ake kia tapahia ki nga wahi iti hei tiaki, ka tango i tetahi wahi o aua mea ka whakamahia hei karo i te paheketanga o te RNA na te whakatotoo me te whakamaroketanga o nga tauira.

3.Ka whakauruhia a RNase ki roto i te ruma mahi, kaore ranei e mau nga karapu tuku, he kanohi kanohi, aha atu.

He whakaaro: Ko nga whakamatautau tangohanga RNA he pai ake te mahi i roto i nga mahi RNA motuhake, me horoi te teepu taiwhanga i mua i te whakamatautau, me mau nga karapu tuku me nga kanohi kanohi i te wa o te whakamatautau kia kore ai e paheke te RNA na te whakaurunga o te RNase ki te nui rawa atu.

4.Ko te reagent kua poke e RNase i te wa e whakamahia ana.

Huatau: Whakakapihia ki te raupapa hou o nga kete tangohanga RNA katoa o te tipu mo nga whakamatautau e pa ana.

5.Ko nga ngongo centrifuge me nga tohutohu pipette e whakamahia ana mo te raweke RNA kua poke ki te RNase.

Huatau: Me mohio ko nga ngongo centrifuge, nga tohutohu pipette, nga pipettes, me etahi atu e whakamahia ana i te tangohanga RNA he RNase-Kore.

Pukapuka Tohutohu:

Tipu Tapeke RNA Isolation Kit Tāpiri Tohutohu