Foreasy HS Taq DNA Polymerase
Whakaahuatanga kete:
◮Te tino motuhake: Ko te enzyme he nui te mahi wera wera.
◮Whakanuia Tere: 10 sec/kb.
◮Te urutau tauira teitei: ka taea te whakamahi kia pai te whakanui i te TeiteiGCuaraamomo tauira DNA uaua-ki-whakanui.
◮Te piripono kaha: Ko te pono e 6 nga waof noa Taq Enzyme.
Whakaahuatanga
Ko te Foreasy HS Taq DNA Polymerase he whākōkī Taq hou e whakaatuhia ana i roto i te Escherichia coli engineering huakita e te hangarau whakakotahi ira.I muri i te maimoatanga o te enzyme ki tetahi tukanga motuhake, ka'Ka aukatihia nga mahi i mua i te whakahoahohenga waiariki, na reira ka aukati i te whakakaha kore-motuhake i puta mai i te whakapouri kore-motuhake o nga mea tuatahi, i nga dimer tuatahi ranei i raro i nga ahuatanga o te pāmahana iti.He pai tenei hua mo te PCR React tino motuhakekatote, He maha x PCR , he ihirangi GC teitei (> 60%),mehanganga tuaruaetahi atu raneikaha ira papamuriicste whakakaha me te ira-ira nuiicste kitenga whakakaha.He 5' → 3' te mahi a te DNA polymerase me te 5' → 3' mahi exonuclease, engari kaore he mahi exonuclease 3' → 5'.
Nga waahanga kete
| Waehanga | IM-01021 | IM-01022 | IM-01023 |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 5000 U (1 mL) | 50 KU (10 mL) | 500 KU (100 mL) |
| 2× Taq Reaction Buffer | 25mL ×5 | 250 mL ×5 | 500 mL × 25 |
Nga waahanga me nga painga
- He tino motuhake: Ko te enzyme he nui te mahi wera wera.
- Whakanuia Tere: 10 hekona/kb.
- Te urutau tauira teitei: ka taea te whakamahi kia pai te whakanui i te TeiteiGCuaraamomo tauira DNA uaua-ki-whakanui.
- Te piripono kaha: Ko te pono e 6 nga waof noa Taq Enzyme.
Te tono kete
- Nga momo PCR/qPCR Pūnaha me te pūnaha PCR tika
- Kohanga DNA Whakanuia PCR
- tohu DNA
- Whakaraupapa DNA
- PCR me te hiku
Whakamaramatanga Mahi
1U : Te nui o te whākōkī e hiahiatia ana hei whakauru i te 10 nmol oDNAki roto i te matū waikawa-kore ma te whakamahi i te DNA parāoa hāmana kua whakahohehia hei tauira / tuatahi, 74 °C, 30 meneti.
Tikanga Tauhohenga
| Te pāmahana | Wā Tauhohenga | Te wa huringa |
| 37°C | 5 min | 1 |
| 94°C | 5 min | 1 |
| 94°C | 10 Hekona | 40 |
| 60°C | 10 Hekona |
Tuhipoka:Mo nga punaha 10 µL me te 20 µL, taapirihia he hinu kohuke riterite ki te kore he taupoki wera o te kaihurihuri waiariki.
He rereke nga ahuatanga o te tauhohenga PCR i runga i nga ahuatanga o te hanganga o nga tauira, nga mea tuatahi, me era atu.I roto i te mahi motuhake, he mea tika ki te hoahoa i nga tikanga tauhohenga tino pai, tae atu ki te pāmahana whakahiato, te wa toronga, me etahi atu, kia rite ki nga tikanga motuhake penei i te momo tauira, te rahi o te kongakonga whaainga, te raupapa turanga o te waahanga kua whakanuia, me te ihirangi GC me te roa o te tuatahi.
Rokiroki
-20 ± 5 °C mo te 2 tau, i te -80 °C ranei mo te rokiroki mo te wa roa.
Karekau he tohu whakakaha
1.Ko te Taq DNA Polymerase i roto i te kete ka ngaro tana mahi na te hee o te rokiroki, te paunga ranei o te kete.
Taunakitanga: Whakapumautia nga tikanga rokiroki o te kete;tāpirihia te rahinga tika o te Taq DNA Polymerase ki te punaha PCR, ki te hoko ranei i tetahi Kete PCR Waa Tuturu hou mo nga whakamatautau e pa ana.
2.He maha nga aukati o Taq DNA Polymerase i roto i te tauira DNA.
Huatau: Whakapaihia te tauira, whakaitihia ranei te nui o te tauira i whakamahia.
3.Ko te kukū Mg2+ e kore e pai.
Taunakitanga: Ko te kukū Mg2+ o te2× Real PCR Mix e whakaratohia ana e matou he 3.5mM.Heoi, mo etahi o nga timatanga me nga tauira motuhake, ka nui ake pea te kukume Mg2+.Na reira, ka taea e koe te taapiri tika i te MgCl2 ki te arotau i te kukū Mg2+.E taunaki ana kia whakanuia te Mg2+ 0.5mM ia wa mo te arotautanga.
4.Ko nga tikanga whakakaha PCR kaore i te pai, a ko te raupapa tuatahi, te kukū ranei he he.
Huatau: whakaū i te tika o te raupapa tuatahi me te mea kaore ano kia whakahekehia te tuatahi;ki te kore e pai te tohu whakakaha, me ngana ki te whakaheke i te pāmahana whakaene me te whakatika tika i te kukū tuatahi.
5.He iti rawa, he nui rawa ranei te nui o te tauira.
Taunakitanga: Whakahaerehia te waimehatanga rōnaki raina tauira, ka kowhiri i te kukū tauira me te painga PCR pai rawa atu mo te whakamatautau PCR Wā Tuturu.
He tiketike rawa te uara o te NTC
1.Reagent contamination meinga i roto i te mahi.
Taunakitanga: Whakakapihia ki nga reagents hou mo nga whakamatautau PCR Wā Tuturu.
2.I puta te poke i te wa e whakarite ana te punaha tauhohenga PCR.
Taunakitanga: Me whai tikanga whakamarumaru i te wa e mahi ana, penei: te mau karapu taherapa, te whakamahi i te pito paipa me te tātari, aha atu.
3.Ko nga mea tuatahi ka whakahekehia, a, ko te whakahekenga o nga mea tuatahi ka nui ake te kaha kore-motuhake.
Huatau: Whakamahia te SDS-PAGE electrophoresis ki te kite mena kua whakahekehia nga mea tuatahi, ka whakakapi ki nga mea tuatahi hou mo nga whakamatautau PCR Wā Tuturu.
Dimer tuatahi, te whakakaha kore-motuhake ranei
1.Kare i te pai te kukū Mg2+.
Taunakitanga: Ko te kukū Mg2+ o te 2× Real PCR EasyTM Mix e whakaratohia ana e matou he 3.5 mM.Heoi, mo etahi o nga timatanga me nga tauira motuhake, ka nui ake pea te kukume Mg2+.Na reira, ka taea e koe te taapiri tika i te MgCl2 ki te arotau i te kukū Mg2+.E taunaki ana kia whakanuia te Mg2+ 0.5mM ia wa mo te arotautanga.
2.He iti rawa te paanga o te PCR annealing.
Huatau: Whakanuia te paemahana whakamahana PCR ki te 1 ℃ ki te 2 ℃ ia wa.
3.He roa rawa te hua PCR.
Taunakitanga: Me noho te roa o te hua PCR Wā Tuturu i waenga i te 100-150bp, kaua e neke ake i te 500bp.
4.Ka whakahekehia nga mea tuatahi, a, ko te whakahekenga o nga waahanga tuatahi ka arahina ki te ahua o te whakanui motuhake.
Huatau: Whakamahia te SDS-PAGE electrophoresis ki te kite mena kua whakahekehia nga mea tuatahi, ka whakakapi ki nga mea tuatahi hou mo nga whakamatautau PCR Wā Tuturu.
5.He kino te punaha PCR, he iti rawa ranei te punaha.
Huatau: He iti rawa te punaha tauhohenga PCR ka heke te tika o te kitenga.He pai ake te whakamahi i te punaha tauhohenga e taunakihia ana e te taputapu PCR ine hei whakahaere ano i te whakamatautau PCR Wā Tuturu.
He kino te tukurua o nga uara ine
1.Kei te kino te taputapu.
Huatau: He hapa pea kei waenganui i ia kohao PCR o te taputapu, ka hua te kore e taea te whakaputa i te wa e whakahaere ana te pāmahana, e kitea ana ranei.Tena koa tirohia kia rite ki nga tohutohu o te taputapu e pa ana.
2.Ko te tauira pokekore kaore i te pai.
Taunakitanga: Ko nga tauira poke ka arai i te koretake o te whakaputanga o te whakamatautau, kei roto ko te parakore o te tauira me nga mea tuatahi.He pai ake te pure i te tauira, a ko nga mea tuatahi ka purea e te SDS-PAGE.
3.He roa rawa te whakaritenga o te punaha PCR me te wa rokiroki.
Huatau: Whakamahia te punaha PCR Wā Tuturu mo te whakamatautau PCR i muri tonu i te whakaritenga, kaua hoki e waiho kia roa rawa.
4.Ko nga tikanga whakakaha PCR kaore i te pai, a ko te raupapa tuatahi, te kukū ranei he he.
Huatau: whakaū i te tika o te raupapa tuatahi me te mea kaore ano kia whakahekehia te tuatahi;ki te kore e pai te tohu whakakaha, me ngana ki te whakaheke i te pāmahana whakaene me te whakatika tika i te kukū tuatahi.
5.He kino te punaha PCR, he iti rawa ranei te punaha.
Huatau: He iti rawa te punaha tauhohenga PCR ka heke te tika o te kitenga.He pai ake te whakamahi i te punaha tauhohenga e taunakihia ana e te taputapu PCR ine hei whakahaere ano i te whakamatautau PCR Wā Tuturu.
-
Kete PCR Tiu Kararehe Tika (kaore he Tauira ...
-
Kete PCR Tiu Kararehe Tika-UNG (kare he Tauira...
-
Kopa Kararehe Kete Whakawehe DNA Tangohanga DNA ...
-
Kararehe Tapeke RNA Wehewehenga Kete Tapeke RNA Tango...
-
Pūtau Tapeke RNA Wehewehenga Kete Tapeke RNA Wehewehenga...
-
General Plasmid Mini Kit General Plasmid DNA Ex...
