Kete PCR Tika Tiaki Zebra Fish Reagent Reagent PCR Tika (zebrafish)
Whakaahuatanga
Ka whakamahia e tenei hua he punaha paatete lysis motuhake hei tuku tere i te DNA ira mai i te ika zebrafish me etahi atu kopa ika waimaori, he tara hiku, he tauira hua hua ika ranei mo nga tauhohenga PCR, no reira he tino pai mo te whakamatautau ira-nui.Ko te tukanga o te tuku i te DNA genomic mai i te lysis buffer ka oti i roto i te 10-30 meneti i te 65°C.Karekau he tukanga pera i te tango i te pūmua me te RNA e hiahiatia ana, ka taea te whakamahi te tohu DNA hei tauira mo te tauhohenga PCR.
2×PCR ngawariTMHe kaha te manawanui o te ranunga ki nga aukati tauhohenga PCR, a ka taea te whakamahi i te lysate o te tauira hei whakamatautau hei tauira mo te whakakaha pai me te motuhake.Kei roto i tenei reagent te ForegeneD-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl2, tauhohenga buffer, PCR optimizer and stabilizer.Ka whakamahia i te taha o te lysis buffer ka taea te kite tere me te ngawari ki nga tauira, me nga ahuatanga o te tairongo teitei, te tino kaha, me te pai o te pumau.
Ko te D-Taq DNA polymerase he DNA polymerase i hangaia e Foregene mo nga tauhohenga PCR tika.Ko te D-Taq DNA polymerase he kaha te manawanui ki nga momo aukati tauhohenga PCR, a ka taea e ia te whakanui i nga tohu o te DNA i roto i nga momo punaha tauhohenga uaua, a ka eke te tere whakakaha ki te 2Kb/min, he mea tino pai mo te tauhohenga PCR Tika.
Whakatakotoranga
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
Nga waahanga kete
Wāhanga I | Kaipupuri FP |
Foregene Protease | |
6× DNA Loading Buffer | |
Wahi II | 2×PCR ngawariTMWhakaranu |
Tohutohu |
Nga waahanga me nga painga
■Kaore e hiahiatia te purenga DNA e pau ana te wa me te utu nui.
■ He iti te tono tauira, ka taea te whakamatautau i te 1mg o te hiwi caudal ika me te 10 nga hua ika.
■ Kaore e hiahiatia nga maimoatanga motuhake penei i te huri me te kuru, a he ngawari te mahi.
■ Hangaia e te punaha PCR kua arotauhia te ahua o te PCR me te kaha ake o te manawanui ki nga aukati tauhohenga PCR.
Tawhā kete
Te Whakamahinga: Te ika Zebra me etahi atu ika wai hou.
Ko te DNA i tukuna mai i te tauira lysis: whakamahia anake hei tauira PCR.
Ka taea te whakamahi i te kete mo nga kaupapa e whai ake nei: te tautuhi i te transgenosis, te whakapapa kararehe, aha atu.
Te rere mahi
Rokiroki me te ora o te Papa
Ko te waahanga tuatahi o tenei kete me penapena ki te 2-8 ℃.
Ko te reagent Buffer FP ka taea te penapena mo nga marama 12 i raro i nga tikanga maroke;ka taea te penapena ki te 2-8 ℃ mo te rokiroki roa.
v Reagent Foregene Protease he tātai ahurei.Hei whakarite i tana mahi me te pumau, tiakina ki te 4 ℃ mo te 12 marama.
vReagent 6×DNA Loading Buffer ka taea te penapena i te 4 ℃, -20 ℃ ranei mo te wa roa.
Ko te wahanga II o tenei kete me pupuri ki te -20 ℃.
vReagent 2×PCR EasyTM Mix, mena ka whakamahia i nga wa katoa, ka taea hoki te penapena ki te 4 ℃ mo te rokiroki mo te wa poto (whakamahia i roto i nga ra 10).