Lnc-RT Heroᵀᴹ I(Me te gDNase)(Super Premix mo te whenu tuatahi cDNA synthesis mai i lncRNA)
Whakatakotoranga
25×20μl Rxns, 50×20μl rxn
Ko Lnc-RT HeroTM I (Me te gDNase) he punaha tuhi whakamuri i hangaia mo te lncRNA kia tere te tango i te poke DNA ira.Ka taea e 5×gDNase Mix te tango tere i te toenga ira i roto i te RNA i te 42°C mo te 2 meneti, me te karo i te pokanoa o te genome ki nga hua qPCR.
Ko te 5×L-RT HeroTM Mix kei roto ko Foregene LncRNA Reverse Transcriptase i hangaia e Foregene, he momo hou whakamuri transcriptase mo te lncRNA me etahi atu tauira matatini RNA roa, me te kaha ake o te hononga RNA me te pai ake o te rekoata whakamuri.Ko te punaha kua arotauhia ka tere ake te reeti whakawhiti whakamuri, ka ngawari te tuhi i nga tauira RNA me nga ihirangi GC teitei me te hanganga tuarua matatini.Ka taea te whakahiatotanga cDNA whenu tuatahi ki te 42°C i roto i te 15 meneti.
Nga waahanga kete
| 5× Whakaranu gDNase |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| RNase-Free ddH2O |
| Tohutohu |
Nga waahanga me nga painga
■Te kaha ki te tango i te gDNA, ka taea te tango i te gDNA i roto i te tauira i roto i te 2 meneti.
■ Ka taea e ia te huri i te whakamaoritanga o te lncRNA.Ina tukuna te hua tuhi whakamuri ki te qPCR, he iti ake te uara Ct i tera o te punaha tuhi whakamuri.
■ He pai te punaha whakawhiti whakamuri, 15 meneti noa iho hei whakaoti i te whakahiatotanga o te whenu cDNA tuatahi.
■ Nga tauira matatini: ka taea hoki te huri i nga tauira whai kiko GC teitei me te hanganga tuarua matatini me te tino pai.
■ Ko te punaha whakamuri whakamuri teitei, ka taea e nga tauira taumata-pg te tiki cDNA kounga teitei.
■ Ko te punaha tuhi whakamuri he teitei te waiariki, ko te pāmahana tauhohenga tino pai ko te 42℃, a he pai tonu te mahi whakawhiti whakamuri i te 50℃.
Te tono kete
lncRNA tātari ine whanaunga.
lncRNA tātari ine tino.
Ka taea e ia te tātari tere me te tika nga tohu RNA penei i te huaketo RNA.
Whakamuri whakamuri o nga tauira RNA me te ihirangi GC teitei, te hanganga tuarua matatini ranei.
Te rere mahi
Rokiroki me te ora o te Papa
Me penapena te kete ki te -20°C. Whakaorangia te hua ki roto i te pouaka whakamahana mahana i te -20°C i muri tonu i te whiwhinga.Mena e tika ana nga tikanga rokiroki, kaore te hua e whakaheke i nga mahi i roto i te waa whaimana 1 tau.
He Aratohu Taatari Raruraru
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-whakakaha motuhake
1. Te hoahoa tuatahi koretake
Taunakitanga: Hoahoa nga papa tuatahi i runga i nga tikanga hoahoa tuatahi.
2. Nga toenga genome.
Huatau: Me whakarite ko te 42°C te waahi tuatahi o te tangohanga o te gDNA, ka taea hoki te whakaroa ki te 5min.
Karekau he tohu whakakaha na RT-qPCR
1. Kua heke te RNA.
Taunakitanga: Ko nga mea mo te tangohanga RNA me hou ano ka taea, me te whakamahi i te RNA kounga teitei me te tino parakore.
2. Kei roto i te RNA nga aukati.
Taunakitanga: Ko te nuinga o nga kai-whakahoki whakamuri ko te SDS, ko nga tote guanidine, ko te EDTA, me etahi atu. E taunaki ana kia horoia te RNA precipitate ki te 70% ethanol hei tango i nga aukati.
3. Nga take hoahoa tuatahi.
Taunakitanga: E ai ki te maapono hoahoa tuatahi, hoahoa ano i nga mea tuatahi mo te tirotiro.
Ka puta te roopu whainga ki te mana patea
1. Te poke o nga taputapu whakahaere, reagents ranei.
Taunakitanga: Ko nga reagents me nga taputapu katoa mo te whakamatautau me autoclave.Kia tupato me te ngawari i te wa e whakahaere ana kia kore e ngotea nga tauira DNA ki roto i te pipette, ka maringi mai ranei i te ngongo centrifuge.
2. I puta te poke i te wa e whakarite ana te punaha tauhohenga PCR.
Taunakitanga: Kia tupato i te wa e whakahaere ana, penei: te mau karapu taherapa, te whakamahi i nga tohutohu tātari.Whakamahia te Waa Tuturu PCR Mix i roto i te punaha parakore.
3. Kua whakahekehia nga mea tuatahi.
Huatau: Whakamahia te SDS-PAGE electrophoresis ki te kite mena kua whakahekehia nga mea tuatahi, me te whakakapi ki nga mea tuatahi hou mo nga whakamatautau rapunga rewharewha.
Pukapuka Tohutohu:
Lnc-RT HeroTM I(Me te gDNase)(Super Premix mo te whenu tuatahi cDNA synthesis mai i lncRNA) Tohutohu
